次价键力在化学键合法固定辣根过氧化酶过程中的 - Ingenta Connect.PDF

物理化学学报(Wuli Huaxue Xuebao) November Acta Phys. -Chim. Sin . 2011, 27 (11), 2697-2704 2697 [Article] 次价键力在化学键合法固定辣根过氧化酶过程中的作用机理 雷青娟 高保娇* 张正国 ( 中北大学化学工程系, 太原030051) 摘要: 将甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)接枝聚合在微米级硅胶微粒表面, 又通过环氧基团的开环反应将乙二 胺(EDA)键合在接枝微粒表面, 制备了双功能复合载体EDA-PGMA/SiO , 通过共价偶联法实施了辣根过氧化 2 酶(HRP)的固定化. 本文重点考察静电相互作用与疏水相互作用两种次价键力在共价键合法固定HRP 过程中 的作用, 探讨作用机理. 结果表明, 在水介质中, 复合载体EDA-PGMA/SiO 表面胺基的质子化作用, 使载体微 2 粒的ζ电位在较大的pH 范围内保持正值; 当介质的pH=8.5, 大于HRP 的等电点时, 酶蛋白与载体之间所产生 的强静电相互作用会显著促进HRP 的固定化; EDA 的键合率在30%附近的载体, 静电相互作用对固酶的促进 作用最强, 固定化酶的偶联率与比活力具有最高值. 疏水相互作用对化学法固定辣根过氧化酶也会产生明显的 作用, 当以接枝微粒PGMA/SiO 为载体时, 增大NaCl 浓度, 可有效促进酶蛋白与载体之间的疏水相互作用, 提 2 高固定化酶的偶联率与比活力. 关键词: 辣根过氧化酶; 固定化酶; 甲基丙烯酸缩水甘油酯; 复合载体; 静电相互作用; 疏水相互作用 中图分类号: O641 Action Mechanism of Secondary Bond Forces on Chemical Immobilization of Horseradish Peroxidase LEI Qing-Juan GAO Bao-Jiao* ZHANG Zheng-Guo (Department of Chemical Engineering, North University of China, Taiyuan 030051, P. R. China) Abstract: Glycidyl methacrylate (GMA) was graft-polymerized onto micron-sized silica gel particles. Ethylenediamine (EDA) was bonded to the surfaces of PGMA/SiO particles by the ring-opening reaction of