藏药旺拉提取物CE对Aβ25-35介导的大鼠神经元毒性损伤作用的探究.pdfVIP

摘要 璃瞄旺拉是二种传统藏药，为兰科植物凹舌兰(Coeotgolssum 补气益血、生津止渴、安神增智等功效，药理研究显示旺拉提取物 CE可以有效改善痴呆小鼠、亚急性衰老小鼠的学习记忆能力。 本研究采用大鼠乳鼠前额叶神经元体外培养的方法，观察藏药 旺拉提取物CE对A1325．35介导的大鼠乳鼠神经元毒性损伤的作用， 采用免疫组织化学方法鉴定了培养的大鼠乳鼠前额叶神经细胞纯 度；采用MTT方法测定了培养的大鼠乳鼠前额叶神经细胞活性； 采用TUNEL法检测了培养的大鼠乳鼠前额叶神经细胞凋亡情况； 采用免疫组织化学方法检测了培养的大鼠乳鼠前额叶神经细胞中 11I蛋白的形态结构及表达。为进一步研究藏药 微管蛋白fl-mbulin 旺拉提取物CE对神经元的保护作用及作用机制提供了新的资料。 主要结论归纳如下： III和 1．对培养第5天的大鼠乳鼠前额叶神经元进行13-mbulin III阳性染色为绿色细胞突起， DAPI免疫组织化学染色，13-mbulin 能较好地显示细胞的形态，DAPI阳性染色细胞核为蓝色，实验结 果显示培养出良好的前额叶神经元，且纯度95％。 2．MTT法和TUNEL法检测细胞的凋亡，发现在培养的大鼠乳 胞有明显的神经毒性，包括细胞活力的下降、细胞凋亡率的增加。 I ’、 ，． j ’、 ，． j IIIandDAPIonthe immunohistochemical[3-tubufin 1．through for5 for neonatalratPFCneuronscultured days，thepositivestaining H1was bettercell cells，showed 13-tubulingreen showedthatthe forDAPlwas results staining blue，experimental neuronofPFCachieved95％． purity theneuronal anddeath MTTand 2．observing viability through TUNELfoundthattreatwith for24hoursin 20岬nol／LA[325．35 rat neuronshadobviousneuronal culturedneonatalPFC toxicity, ofcell andincreaseofcell thedecline viability apoptosis including rate．