鱼腥草多糖提取工艺及成分分析研究.pdfVIP

云南大学学报 (自然科学版)，2008，30(4)：396～400 CN 53—1045／N 则 0258—7971 Journal of Yunnan University 鱼腥草多糖提取工艺及成分分析研究 王素萍 ，杨亚玲 ，李晚谊 ，毕 莉 ，刘谋盛 (1．昆明理工大学化工学院，云南 昆明 650224；2．云南省农业科学院药用植物研究所，云南 昆明 650223) 摘要：研究了鱼腥草多糖的提取工艺．结果表明，鱼腥草多糖的最佳提取工艺为：液固比(V／m，mL／g，下 同)30：1，80℃水浴提取3次，每次2 h，多糖提取率达3．5％．除蛋白、上凝胶层析分离柱得多糖纯品，用Waters Sep—pak C】8固相萃取小柱预分离，以Waters carbohydrate高效糖柱为固定相， (乙腈)： (水)=70：30为流 动相分离，蒸发光散射仪为检测器检测，得到鱼腥草多糖组成 m(木糖)：m(果糖)：m(阿拉伯糖)： (半乳糖) = 2．209：1．587：1．000：2．092． 关键词：鱼腥草；多糖；提取工艺；成分分析 中图分类号：0 629．12 文献标识码：A 文章编号：0258—7971(2008)04—0396—05 鱼腥草(Houttu~ nia cordata Thunb．)为三白 D一果糖(Sigma公司)；D一木糖 (Supelco公 草科蕺菜属植物，分布于我国中部、东南部至西南 司)；DL一阿拉伯糖、半乳糖(Fluka公司)；各种糖 各省区．药理研究表明鱼腥草具有：①抗菌作用； 标样的纯度质量分数均大于99％．乙腈、甲醇为色 ②抗病毒作用；③增强机体免疫功能；④利尿作 谱纯试剂(Fisher公司)．实验用水为高纯水． 用；⑤抗炎抗过敏平喘作用；⑥ 毒副作用，实验表 1．2 色谱条件 分析柱为Waters carbohydrate高 明鱼腥草毒性较小l1 j．鱼腥草药理作用研究表 效糖柱(wAT044355，250 mm X 4．6 mm，4 m)， 明其生物活性较高，资源丰富，是一种不可多得的 配有预柱(wAT046895，12．5 1TI1TI X 4．6 mm，4 药食两用植物，而且因是一种高效、多功能、无污 m)，Waters公司产品．流动相为 V(乙腈)：V(水) 染、无残留的天然产物而倍受青睐l4，5j，鱼腥草黄 = 70：30，流速为1．0 mL／min；柱温为25 oC；进样 酮及活性的测定已有报道【 j．本文对鱼腥草中 量10 L；ELSD的漂移管温度80℃，氮气作载气， 水溶性多糖进行提取，除蛋白、上凝胶层析分离柱 流速2．00 L／min．在该条件下糖标样及样品的色 得多糖纯品，用Waters Sep—pak C】8固相萃取小柱 谱图见图1、2所示． 预分离，以Waters carbohydrate高效糖柱为固定相 1．3 多糖样品处理 称取经干燥、剪碎的鱼腥草 进行组成鱼腥草多糖的单糖成分测定l9]． 样品2．0 g，置于烧杯中，加入100 mL水，于80℃ 水浴中加热提取3次，每次2 h，滤去残渣，合并滤 1 实验部分 液，再将滤液浓缩至10 mL左右，然后加入浓缩液 1．1 试剂与仪器 Waters 2695 Alliance高效液相 的4～5倍量95％乙醇进行醇析，隔夜观察，待至 色谱系统，包括四元梯度泵，Empower色谱工作 第2天有大量醇析物，然后将上清液除去，将醇析 站，ELSD 2000蒸发光散射检测器 (美国Waters 物置于水浴锅里蒸干，完毕后即得甜茶多糖的粗产 公司)；Milli—Q5o高纯水处理器、(美国Millipore 品，再将多糖用蒸馏水定容于100 mL的容量瓶 公司；Waters Sep