分析化学 石绍会 分化-第6章.pptVIP

* 返回 吸收池：(比色皿)用于盛待测及参比溶液。 可见光区：光学玻璃池 紫外区：石英池 检测器：利用光电效应，将光能转换成电流讯号。 光电池，光电管，光电倍增管 指示器：低档仪器：刻度显示 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录 主要部件 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 ∞ 1.0 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.15 0.1 0.05 0 T％ A * 6.3 显色反应及吸光度的测定 邻二氮菲法测定水果蔬菜等中的微量铁？ 分光光度法测定过程： 显色反应 仪器条件的选择 吸光度的测定及误差分析。 Fe2+ + 3R = [FeR3]2+ * 吸光度的测定 开始 开始 开始 开始 返回 显色反应—要求及影响因素 仪器条件的选择 吸光度的测量-结果的获得 误差来源 * 一、显色反应 无色（或浅色） 深色 M + R = MR 被测组分 显色剂 显色反应: 加入显色剂使无色或浅色物质变成深色物质的过程。 用邻二氮菲法测铁，在Fe2+中加入邻二氮菲亚铁（用R表示）时 Fe2+ + 3R = [FeR3]2+ 橘红色 * （一）显色反应的要求 1、选择性好： R只和M或只和少数共存组分反应 2、灵敏度高： 一般要求 产物MR的摩尔吸光系数高 3、稳定性好： MR组成稳定，化学性质稳定 4、色差大： 对比度 不同颜色的可见光波长及其互补光 ?/nm 互补光 颜色 400-450 紫 黄绿 450-480 蓝 黄 480-490 绿蓝 橙 490-500 蓝绿 红 500-560 绿 红紫 560-580 黄绿 紫 580-610 黄 蓝 610-650 橙 绿蓝 650-760 红 蓝绿 * （二）显色反应条件确定 M + R = MR 显色的条件（x）包括：显色剂用量(浓度)、酸度、显色时间、显色温度以及溶剂等。 以上各条件（x）均由实验来确定。具体方法是： 见P171～173 固定其它反应条件不变，只改变其中的某一条件（xi） ，逐一在相同测定条件下测量各吸光度，作A- x曲线。 * 1、显色剂R用量的确定 例：用邻二氮菲法测铁中，当在Fe2+中加入邻二氮菲（用R表示）时 Fe2+ + 3R = [FeR3]2+ 事先配制10.00mg.mL-1铁标准液和0.15%的邻二氮菲水溶液， 固定其它反应条件不变，只改变加入R的体积（相当于改变浓度）进行显色反应，逐一在相同测定条件下测量各吸光度，作A-R曲线。 A cR 2.0mL 当铁标准液取0.2mL～2.0mL时： 加2.0mL0.15%的邻二氮菲水溶液最好 * c(R) c(R) c(R) 确定显色剂用量（c(M)、pH一定） M + R = MR * pH1pHpH2 用邻二氮菲法测铁中，pH = 2.0～9.0 （加5.0mL 1.0mol.L-1 醋酸钠即可满足） 2、 确定显色反应酸度（c(M)、 c(R)一定） * 3、确定显色温度及显色时间： (c(M)、 c(R) 、 pH一定) T1(22) T2(40) t1(2) t2(30) t(oC) T(min) 返回 邻二氮菲法测铁中，室温T=25 oC下进行，显色反应进行t=2分钟 另外，还有介质条件、有机溶剂、表面活性剂等。还应考虑干扰的消除。 * 二、仪器条件的选择 （一）测定波长 1、无干扰：选择 吸收光谱(或吸收曲线) * （一）测定波长 2、有干扰：“干扰最小，吸收最大” * 515 655 415 500 钍-偶氮砷III 钴-亚硝基红盐 A A 配合物 配合物 试剂 试剂 测定波长 * （二）控制读数范围 控制条件，使得读数在A=0.2~0.8(T=15%~65%)范围 用邻二氮菲法测铁中， 配合物浓度5.00mg.L-1以下均可以。 （ 10.00mg.mL-1铁标准液取0.2mL～2.0mL 即可满足） 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 ∞