北京林业大学（杨海灵）生物化学A之酶学2014.pptVIP

Biochemistry I 生物化学上册 To be lectured by : Dr. 杨海灵 公共邮箱：biochemistry_bjfu@163.com 通用密码 第四章 酶学 酶及生物催化剂概念的发展 酶的化学本质及类别 酶的命名和分类（略讲） 酶专一性类型 绝对专一性和相对专一性 消化道内几种蛋白酶的专一性 酶作用专一性机理 酶专一性的“锁钥学说” 酶专一性的“诱导契合学说” 酶促反应速度的测定与酶的活力单位 酶促反应初速度的概念 Biochemistry I 生物化学上册 To be lectured by : Dr. 杨海灵 公共邮箱：biochemistry_bjfu@163.com 通用密码 酶反应速度与底物浓度的关系曲线 单分子酶促反应的米氏方程及Km 米氏常数的意义 米氏常数的测定 酶动力学的双倒数图线 3、pH对酶反应速度的影响 4、温度与酶反应速度的关系 5、激活剂对酶作用的影响 6、抑制剂对酶作用的影响 抑制剂类型和特点 竞争性抑制作用 非竞争性抑制作用 反竞争性抑制作用 竞争性非竞争性抑制作用机理示意图 竞争性抑制曲线 非竞争性抑制曲线 反竞争性抑制曲线 有无抑制剂存在时酶促反应的动力学方程 非专一性不可逆抑制剂 专一性不可逆抑制剂 Biochemistry I 生物化学上册 To be lectured by : Dr. 杨海灵 公共邮箱：biochemistry_bjfu@163.com 通用密码 第四节 酶的作用机制和调节 胰凝乳蛋白酶的活性中心 羧肽酶活性中心示意图 4.2酶高效催化的策略 4.3.1溶菌酶催化的反应 溶菌酶-底物复合物 溶菌酶活性中心与底物结合示意图 溶菌酶底物D环变形模型 溶菌酶催化反应机理 胰凝乳蛋白酶分子中催化三联体构象 胰凝乳蛋白酶反应的详细机制（1） 胰凝乳蛋白酶反应的详细机制（2） 4.4 酶活性的调节机制 一、多酶体系和多酶复合体 二、酶的别构（变构）效应和别构酶 酶的别构（变构）效应示意图 正、负协同别构酶与非调节酶的动力学曲线比较 别构酶与米氏酶的动力学曲线比较 ATCase所催化的反应 E.coli的ATCase的亚基排列 ATCase的半分子结构 ATCase的别构过度作用 PALA(N-磷乙酰-L-天冬氨酸)结合到ATCase活性中心的模型 ATCase变构效应的动力学特征 三、酶的共价修饰 蛋白质的磷酸化和脱磷酸化 共价修饰反应的例子 级联系统调控糖原分解示意图 四、酶 原 的 激 活 胰蛋白酶原的激活示意图 胰蛋白酶对各种胰脏蛋白酶的激活作用 五、酶的多种分子形式——同工酶 E.Coli 中Thr、Met和Lys的合成 六、抗体酶 诱导法制备具有酯酶活性的抗体 第五节 酶工程简介 人工模拟酶?-benzyme 生物酶工程示意图 抗体酶（abzyme）又称催化抗体（catalytic antibody）,是指通过一系列化学与生物技术方法制备出的具有催化活性的抗体，它除了具有相应免疫学性质，还类似于酶，能催化某种活化反应。 抗体与酶相似，都是蛋白质分子，酶与底物的结合及抗体与抗原的结合都是高度专一性的，但这两种结合的基本区别在于酶与高能的过度态分子向结合，而抗体则与抗原（基态分子）相结合。利用抗体能与抗原特异结合的原理可用过度态类似物作为半抗原来诱发抗体，这样产生的抗体便能特异地识别反应过程中真正的过渡分子，从而降低反应的活化能。达到催化反应的目的，这种具有催化功能的抗体就被称为催化抗体或抗体酶。 O – C – A. 酯酶的底物–酯 B.酯的羧基碳原子受到亲核攻击形成四面体过渡态 C.设计的磷酸酯类似物,作为抗原去免疫实验动物 磷酸酯类似物(半抗原) 对酯水解反应有催化作用的单克隆抗体 免疫 免疫反应 一、化学酶工程 ?天然酶 ?固定化酶 ?化学修饰酶 ?人工模拟酶 二、生物酶工程 ?克隆酶 ?突变酶 ?新酶 将酶学和工程学相结合，产生了酶工程(enzyme engineering)这样一个新的领域。酶工程主要研究酶的生产、纯化、固定化技术、酶分子结构的修饰和改造以及在工农业、医药卫生和理论研究等方面的应用。 环糊精 催化侧链 催化侧链连接到环糊精上，可模拟胰凝乳蛋白酶 环糊精分子结构 环糊精结构模型 酶的蛋白质结构功能 新酶分子蓝图 选择性修饰方案 突变酶 新酶 克隆酶 产品 效用 发展 酶基因 遗传设计 遗传