聚羟基丙烯酸和Van-clear替代传统试剂在FISH 法检测宫颈hTERC .PDF

北 京 大 学 学 报 （ 医 学 版 ） ·３５６· ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＰＥＫＩＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＨＥＡＬＴＨＳＣＩＥＮＣＥＳ）　Ｖｏｌ．４８　Ｎｏ．２　Ａｐｒ．２０１６ ·技术方法 · 聚羟基丙烯酸和Ｖａｎｃｌｅａｒ替代传统试剂在 ＦＩＳＨ 法检测宫颈ｈＴＥＲＣ基因中的应用比较 △ 陈志强 ，王　莹，米贤军，陈　昂，黄华勇，钟守军，邓文同，刘超凡，徐秀梅，代新珍 （南方医科大学附属中山博爱医院病理科，广东中山　５２８４００） ［摘　要］目的：观察环保固定液（聚羟基丙烯酸、环保透明脱蜡液Ｖａｎｃｌｅａｒ单独或联合）替代传统固定液［４％（体 积分数）中性缓冲甲醛、传统透明脱蜡液二甲苯］应用于荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）法检 测宫颈组织中人端粒酶核糖核酸组分（ｈｕｍａｎｔｅｌｏｍｅｒａｓｅＲＮＡｃｏｍｐｏｎｅｎｔ，ｈＴＥＲＣ）基因扩增的差异。方法：收集 ２０１３年３月到２０１５年４月于中山市博爱医院妇科住院部送检的２５５例宫颈组织标本，同一病变部位切取４个样 本，分为４组，命名为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ组：Ａ组采用４％中性缓冲甲醛固定、二甲苯透明脱蜡制作切片；Ｂ组采用聚羟基丙 烯酸固定、二甲苯透明脱蜡制作切片；Ｃ组采用４％中性缓冲甲醛固定、Ｖａｎｃｌｅａｒ透明脱蜡制作切片；Ｄ组采用聚羟 基丙烯酸固定、Ｖａｎｃｌｅａｒ透明脱蜡制作切片。采用ＦＩＳＨ技术检测４组宫颈标本中ｈＴＥＲＣ基因。结果：在ＦＩＳＨ法 检测宫颈各级病变组织ｈＴＥＲＣ基因时，荧光显微镜下，Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ四组的组织轮廓和背景均清晰，探针定位准确，可 见耀眼的红／绿荧光信号。Ｂ、Ｃ、Ｄ组与Ａ组阳性率相比差异均无统计学意义（Ｐ＞０．０５），且ＦＩＳＨ结果符合率高。 结论：环保试剂聚羟基丙烯酸、Ｖａｎｃｌｅａｒ有潜在的可能单独或联合替代４％中性缓冲甲醛、二甲苯应用于ＦＩＳＨ法 检测宫颈ｈＴＥＲＣ基因。 ［关键词］病理学，临床；组织固定；石蜡包埋；原位杂交，荧光；末端转移酶端粒ＲＮＡ ［中图分类号］Ｒ３６５　　［文献标志码］Ａ　　［文章编号］１６７１１６７Ｘ（２０１６）０２０３５６０５ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１１６７Ｘ．２０１６．０２．０３３ ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｂｅｔｗｅｅｎｐｏｌｙｈｙｄｒｏｘｙａｃｒｙｌｉｃａｃｉｄａｎｄＶａｎｃｌｅａｒｒｅｐｌａｃｉｎｇｔｈｅｔｒａｄｉ ｔｉｏｎａｌｒｅａｇｅｎｔｓｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｃｅｒｖｉｃａｌｈＴＥＲＣｇｅｎｅｓｂｙａｄｏｐｔｉｎｇＦＩＳＨｔｅｃｈｎｉｑｕｅ △ ＣＨＥＮＺｈｉｑｉａｎｇ，ＷＡＮＧＹｉｎｇ，ＭＩＸｉａｎｊｕｎ，ＣＨＥＮＡｎｇ，ＨＵＡＮＧＨｕａｙｏｎｇ，ＺＨＯＮＧＳｈｏｕｊｕｎ，ＤＥＮＧＷｅｎｔｏｎｇ， ＬＩＵＣｈａｏｆａｎ，ＸＵＸｉｕｍｅｉ，ＤＡＩＸｉｎｚｈｅｎ （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙ，ＺｈｏｎｇｓｈａｎＢＯＡＩＨｏｓｐｉｔａｌＡｆｆｉｌｉａｔｅｄｔｏＳｏｕｔｈｅｒｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｏｎｇｓｈａｎ５２８４００， Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ） ＡＢＳＴＲＡＣＴ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｏｆｔｈｅｈｕｍａｎｔｅｌｏｍｅｒｅｓＲＮＡｃｏｍｐｏｎｅｎｔ（ｈＴＥＲＣ） ｇｅｎｅｓ’ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｃｅｒｖｉｃａｌｔｉｓｓｕｅｂｙａｐｐｌｙｉｎｇｔｈｅｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｆｒｉｅｎｄｌｙｆｉｘａｔｉｖｅｐｏｌｙｈｙｄｒｏｘｙ ａｃｒｙｌｉｃａｃｉｄａｎｄｔｈｅｔｒａｎｓｐａｒｅｎｔｄｅｗａｘｉｎｇｓｏｌｕｔｉｏｎＶａｎｃｌｅａｒｓｅｐａｒａｔｅｌｙｏｒｊｏｉｎｔｌｙｔｏｒｅｐｌａｃｅｔｈｅｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｆｉｘａｔｉｖｅ４％ （ｖｏｌｕｍｅｆｒａｃｔｉｏｎ）ｎｅｕｔｒａｌｂｕｆｆｅｒｅｄｆｏｒｍａｌｉｎａｎｄｔｈｅｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌｔｒａｎｓｐａｒｅｎｔｄｅｗａｘｉｎｇｓｏｌｕ ｔｉｏｎｘｙｌｅｎｅｉｎｔｈｅｕｓｅｏｆｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（ＦＩＳＨ）ｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｉｎｔｈｅｓｔｕｄｙ， ２５５ｃａｓｅｓｏｆｃｅｒｖｉｃａ