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血清表皮生长因子检测在类风湿关节炎患者中临床探究
血清表皮生长因子检测在类风湿关节炎患者中临床探究【摘要】 目的 通过检测类风湿关节炎(RA)患者血清中表皮生长因子(EGF)的水平,探讨其在RA发病过程中存在的意义。方法 将研究对象分为RA组和健康对照组,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定两组血清中EGF水平。同时测定RA 患者的类风湿因子(RF)、红细胞沉降率(ESR)和C反应蛋白(CRP)。用统计学分析EGF在各组血清中的变化及其与临床各项指标间的相关性。结果 RA组血清EGF水平较正常对照组显著升高(P0.05)。结论 血清EGF水平在RA组明显升高,在骨质破坏组尤为明显。提示EGF在诊断RA中有一定价值,可能部分地参与RA的发病过程。?
【关键词】
关节炎;类风湿;表皮生长因子
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作者单位:266011山东省青岛市市立医院检验科
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表1
加样回收率试验(n=5)
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成分序号样品量/μg加入量/μg测得量/μg回收率/%平均回收率/%RSD/%
酚酞179.773816.28896.6001100.56100.100.26
280.704896.877999.88
379.557995.8786100.03
476.187392.4897100.02
582.675098.9899100.03
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?
图1
酚酞片中酚酞含量测定的HPLC 色谱图?
A,酚酞对照品及系统适应性、B,酚酞样品、C,空白
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2.9 样品含量测定 取4批样品分别按上述方法制备及色谱条件测定,以标准曲线方程计算含量,并与现行标准测的酚酞含量进行比较,结果见表2。?
3 讨论?
3.1 流动相的选择 参阅相关资料[1?3],选择甲醇?0.05%磷酸为流动相,通过调整比例和流速进行考察后发现,以甲醇?0.05%磷酸(70?∶?30)流速0.8 ml/min为流动相时,酚酞和荧光母素分离效果好,保留时间、对称因子、塔板数均符合要求。?
表2
酚酞片含量测定结果(标示量的百分含量%)
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批号HPLC(%)UV(%)
9699.95
100907199.06100.16
8597.15
091207100.06102.66
3.2 检测波长的选择 采用PDA检测器,采集210~400 nm?3 d图谱,提取酚酞色谱峰处的光谱图,表明其在229nm与275nm波长处有最大吸收,在229nm波长处溶剂的紫外吸收会影响测定,故选择275nm作为检测波长。?
3.3 溶剂的选择 酚酞水溶性较差,可溶于甲醇、乙醇,原标准[4]采用乙醇作为溶剂,荧光母素采用无水乙醇作为溶剂。在使用甲醇作为溶剂时发现,荧光母素溶于甲醇后不稳定,放置一段时间,即出现絮凝,改用乙醇,即无该现象。综合考虑,在配置对照品贮备液时用乙醇作为溶剂,在二步稀释时采用流动相作为溶剂,样品采用乙醇超声10 min即可溶解。?
参 考 文 献?
[1] 吴红英.高效液相色谱法测定酚酞片中酚酞含量研究.山西医药杂志,2010,39(2):161?162.?
[2] 王玫,曹霞.HPLC法测定酚酞片的含量探讨.黑龙江医药,2009,22(3):260?261.?
[3] 梁选革,伍国怡.高效液相色谱法测定酚酞溶液与酚酞片中荧光母素含量.医药导报,2006,25(11):1210?1211.?
[4] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部).北京:化学工业出版社,2010:882.
Clinical significance of detecting serum epidermal growth factor Level in patients with rheumatoid arthritis
ZHANG Bin?guo,LUAN Qing?xin.Department of Clinical Laboratory,Qingdao Muniapal Hospital,Qingdao 266011,China
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【Abstract】 Objective
To detect the serum levels of epidermal growth factor(EGF)in rheumatoid arthritis(RA)patients,and explore the possible role of EGF in RA. Methods All the cases were individed into two groups: RA p
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