高效液相色谱柱后衍生法测定蔬菜中氨基杀虫剂农药残留.docVIP

高效液相色谱柱后衍生法测定蔬菜中氨基杀虫剂农药残留【摘要】 目的 研究探讨一种快速分离、检测氨基甲酸酯类农药含量的方法。方法 本文采用高效液相色谱－柱后衍生法对蔬菜中10种氨基甲酸酯类农药的含量进行了测定。结果 该方法的回收率在96．46%～98．32%之间，相对标准偏差在1．54%～3．84%之间，分离效果好，干扰少。结论 高效液相色谱柱后衍生法准确度和精密度都要好于气相色谱法，非常适用于蔬菜中氨基甲酸酯类农药的分析和监测。 【关键词】 高效液相色谱；柱后衍生；氨基甲酸酯；蔬菜 氨基甲酸酯类农药是一类广谱性农药，杀虫效果好，作用速度快，在农作物种植与中药材栽培中被广泛使用。我国现有检测方法缺点主要是操作繁琐，较难实现多种氨基甲酸酯类农药同时准确、方便地测定，检测过程时间长，以及直接接触有毒农药，既繁琐，又不安全。本文选用高效液相色谱柱后衍生法检测氨基甲酸酯类农药残留，旨在建立一种选择性强，灵敏度高，重现性好的检测方法。 1 材料与方法 1．1 原理 氨基甲酸酯类农药在碱性条件下水解产生甲胺，甲胺与衍生化试剂邻苯二甲醛（OPA）、巯基乙醇反应，生成强荧光物质，以荧光检测器检测。 1．2 试剂 灭威亚砜、灭威砜、杀线威、灭多威、涕灭威、残杀威、克百威、西维因、甲硫威混合标准溶液：浓度均为10 μg/ml?；甲醇，乙腈：色谱纯；去离子水；OPA稀释剂； OPA固体。 1．3 仪器 Agilent1100HPLC,配荧光检测器，四元梯度泵，自动进样器，脱气机，恒温柱温箱；PCX5200型柱后衍生装置；纯水系统。 1．4 样品处理 1．4．1 样品提取 样品50 g，切碎，加入50 g氯化钠，200 ml?丙酮，150 ml二氯甲烷，匀浆1 min, 静止片刻。将上清液，加入30 g无水硫酸钠，静置30 min，移取28 ml，用少量二氯甲烷洗涤无水硫酸钠，合并滤液，用旋转蒸发器30℃～40℃下，减压浓缩近干，净化。 1．5 色谱条件 1．5．1 液相色谱条件 色谱柱：C?18?柱（4．0×250 nm,5 μm?）;柱温25℃；流动相：甲醇/水=15/85；流速：0．8 ml/min;荧光激发波长330 nm；发射波长465 nm。 1．5．2 柱后衍生条件 衍生试剂①水分解试剂CB130直接注入储罐中；衍生试剂②注入945ml OPA稀释剂（CB910）到溶剂储罐，用氮气吹扫至少10 min,100 mg OPA固体溶解于约10 ml的色谱纯甲醇中，使其完全混合。反应器：A温度70℃，流量0．5 ml/min;B温度30℃, 流量0．3 ml/min;衍生试剂流速：0．3 ml/min。 2 结果与讨论 2．1 提取试剂的选择 本实验选择了苯、乙酸乙酯、卤代烃等多种有机溶剂对于10种氨基甲酸酯农药的提取效率实验，实验表明：用二氯甲烷分两次提取即能得到较高的回收率，而且干扰少。 2．2 分离性能、线性关系及最低检出浓度 在本实验条件下，10种氨基甲酸酯农药都取得了较好的分离效果和很好的峰形，没有互相干扰，符合农药多残留检测的要求。将10 μg/L的标准溶液按照一定比例稀释成5种不同浓度的标准系列浓度进行检测，测得其相应峰高或峰面积与浓度呈线性相关性，以两倍信噪比计算最低检出浓度。见表1。 2．3 方法回收率 在大白菜样品中加入2．00、3．00、5．00 μg/L的3种不同浓度的10种氨基甲酸酯农药的混合标准溶液，10种氨基甲酸酯农药的加标回收率在96．46%～98．32%之间，相对标准偏差在1．54%～3．84%之间，回收率和标准偏差满足实验要求。 2．4 同国标方法比对 对同一样品用本法和国标GB/T5009．163-2003方法平行测定7次后进行比对，经t检验，无显著统计学意义。本法采用高效液相色谱柱后衍生荧光法对10种氨基甲酸酯农药进行同时测定，实验证明方法准确可靠，操作方便，实用性强，具有很好的线性关系和分离效果。 1