高效液相色谱法测定独活寄生丸中蛇床子素含量.docVIP

高效液相色谱法测定独活寄生丸中蛇床子素含量【摘要】 目的 建立高效液相色谱法测定独活寄生丸中蛇床子素的含量。方法 采用Hypersil ODSC18?(4.6 mm×200 mm,5 μm)色谱柱,甲醇-水(68:32)为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长322 nm。 结果 蛇床子素在0.0279~0.2511μg范围内呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为100.19%(n=6),RSD=1.23%。结论 所建立的方法稳定、可靠,可为该产品建立质量控制方法提供参考。 【关键词】高效液相色谱法;独活寄生丸;蛇床子素;含量测定 HPLC determination of osthole in Duhuojisheng pills CAO Xia-fei,ZHOU Lin.HengyangCenter forDisease Control,Hengyang 421001,China 【Abstract】 Objective To establish a HPLC method for determination of osthole in Duhuojisheng pills.Methods A Hypersil ODSC18? column(4.6 mm×200 mm,5 μm)was used with a mobile phase of methanol-water(30:70),the flow rate was 1.0 ml/min,detection wavelength at 322nm.Results The linearity range was0.0279-0.2511 μg(r=0.999 9),average recovery rate was 100.19%(n=6),RSD=1.23%.Conclusion This method is accurate and reproducible,and availed for quality control the Duhuojisheng pills. 【Key words】 HPLC;Duhuojisheng pills;Osthole;Determination 独活寄生丸由独活、桑寄生、当归、熟地黄、党参等组成,具有养血舒筋,祛风除湿的功效,用于风寒湿痹,腰膝冷痛等。该药品标准收载于《卫生部药品标准中药成方制剂第二册》,缺含量测定项。方中独活为君药,有祛风除湿,通痹止痛的功效,其主要有效成份为蛇床子素[1],本文采用高效液相色谱法对独活的蛇床子素进行了含量测定研究。该方法稳定、可靠,可为该产品建立质量控制方法提供参考。 1 仪器与试药 岛津LC-10AD高效液相色谱仪(配有SPD-10A检测器,N2000色谱工作站),AE240电子分析天平(梅特勒公司)。蛇床子素对照品(供含量测定用,批号:110822-200406,中国药品生物制品检定所提供),3批独活寄生丸(批号分别为20060516。甲醇为色谱纯,水为超纯化水,其他试剂均为分析纯。 2 溶液的制备 对照品溶液精密称取蛇床子素对照品13.95 mg,置100 ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取1 ml,置10 ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。 供试品溶液取本品适量,剪碎,取约3 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50 ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250 W,频率45 KHz)40 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液即得。 缺独活阴性样品溶液取缺独活阴性样品,同“2.2”项下方法操作,即得。 3 方法与结果 3.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱为Hypersil ODSC18?(4.6 mm×200 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(68:32),流速为1.0 ml/min,柱温为25℃。分别精密吸取“2”项下对照品溶液、供试品溶液及缺独活阴性样品溶液各10 μl,注入液相色谱仪,按本色谱条件测定。结果蛇床子素理论塔板数为11000以上,蛇床子素与邻近的杂质峰分离度为2.3以上,阴性样品在蛇床子素对照品相同保留时间位置上未见色谱峰,说明方中其他成分对蛇床子素测定无干扰,结果见图1。 A.对照品 B.样品 C.阴性样品 图1 HPLC色谱图 3.2 线性关系考察 精密吸取“2.1” 项下对照品溶液(0.013 95 mg/ml),分别吸取续滤液2、6、10、14、18 μl注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积,并以峰面积(Y)对进样量(X,μg)