高效液相色谱法测定脂肝康合剂中大黄酚含量.docVIP

高效液相色谱法测定脂肝康合剂中大黄酚含量【摘要】 目的 建立脂肝康合剂质量控制方法。方法 采用液相色谱法测定大黄酚含量。 结果 经方法学考察，各项指标均符合规定，方法回收率为97．2%，RSD为1．80%。结论 为该制剂质量分析提供了可行的分析方法。? 【关键词】脂肝康合剂；大黄酚；高效液相 脂肝康合剂由决明子、丹参、芍药等十余味中药经提取加工制成，具有活血化瘀，软坚散结之功效。临床用于脂肪肝治疗，取得了满意的疗效。为确保其制剂质量，我们采用HPLC法测定决明子大黄酚含量，方法与条件如下。? 1 仪器与试剂? 岛津LC-6A液相色谱仪，中北工作站。大黄酚对照品购于中国药品生物制品检定所，所用试剂均为分析纯。? 2 方法与结果? 2．1 色谱条件 色谱柱shim-packCLC-ODS(6．0 mm×150 mm)流动相为甲醇-0．025 mol/L磷酸(9?∶?1)检测波长 428 nm。? 2．2 线性范围考察 精密称取大黄酚对照品5．01 mg 置50 ml容量瓶中，加甲醇溶解定容至刻度。精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10 μl，测定色谱峰面积，以进样量为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标，经线性回归，回归方程为 Y=1 653 272．1x-7231．4r=0．999 9 进样量在0．1~0．5μg范围内线性关系良好。? 2．3 供试品溶液制备 精密吸取本品10 ml，加水10 ml，混匀，加2．5 mol/L硫酸溶液15 ml，沸水浴缓缓回流1 h，放冷，加氯仿30 ml，水浴回流提取0．5 h,放冷，分取氯仿液，水层加氯仿萃取3次(30，30，20 ml)，合并，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解，定容至25 ml量瓶中，经微孔滤膜(0．45 μm)滤过，即得。? 2．4 阴性干扰试验考察 按处方去除其它药味按供试品制成阴性液，分别吸取供试液，阴性液与对照液各10 μl，分别进样。测定结果提示，供试品具有与对照品相同保留的色谱峰，阴性液无干扰。附图见1、2、3。? 2．5 稳定性试验考察 精密吸取供试液10 μl，进样分析，分别在0、2、4、6、8 h分别进样，测定结果见表1，测定结果提示，8 h内色谱峰面积无明显变化，RSD%为1．08%，在此时间内测定，其化学成分化学性质稳定。? 2．6 精密度试验考察 分别吸取供试品溶液10 μl,连续进样5次，测定色谱峰面积。测定结果见表2，精密度试验良好。? 2．7 重复性试验 取同一批号样品5份，每份各10 ml，按供试品溶液制备方法制成供试液，按前述色谱条件测定，结果见表3。? 2．8 回收率试验 精密吸取样品5 ml，加入大黄酚对照液(0．24 ml/ml)5 ml，按样品含量测定项下制备样品液并进行测定，测定结果见表4。 3 讨论? 3．1 大黄酚分别在224 nm、428 nm下有最大吸收峰，采用紫外224 nm下测定供试液干扰组分较多，在428 nm下测定，在选定的色谱条件下，供试品溶液与相邻组分分离度良好。? 3．2 经对酸水解时间考察，水解时间为1 h,样品中大黄酚已基本提取完全，故选择水解1 h。? 参考文献 ［1］ 季芳，阙瑞艳，周小军.高效液相色谱法测定苦黄颗粒中大黄素和大黄酚的含量.陕西中医学院学报， 2005,28(6)：49.? ［2］ 刘晋华，屈梅芳，尤光甫.RP-HPLC测定消炎止血颗粒中大黄素和大黄酚的含量.中国药事， 2006,20(7)：421-422.? 1