单抗与多抗的区别及比较.pdfVIP

活性蛋白整体方案 单抗与多抗的区别比较 描述：随着单抗与多抗的广泛应用，人们对两者的关注度也越来越高，单抗和多抗的区别、它们各自的优缺点也成 为人们关注的焦点。本文主要介绍了单克隆抗体与多克隆抗体的定义，单抗、多抗制备的大致流程以及它们各自的 特点和应用。 定义 抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇，也称为抗原表 位。一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇，因此，机体也可以产生多种不同 的抗体。由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体， 称为单克隆抗体。而由多个B淋巴细胞克隆产生的，受到多种抗原决定簇刺激 并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体。从某种角度而言，多抗是 多种单抗的混合物。 区别 制备的区别 经过特定抗原处理过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞，经HAT培养基筛选、 ELISA检测效价后就得到阳性克隆株，最后进行细胞培养或将细胞注入到动物（一般为balb/c小鼠）腹腔中用腹 水培养，收集上清/腹水纯化后就能得到单克隆抗体。而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐，只需将抗原（纯 度越高越好）直接注入到动物体内进行免疫，经过3~4次免疫，ELISA测其效价合格后，收集血液离心得到上清， 纯化后即能得到多克隆抗体。因此制备多抗的周期就比单抗的短，首次制备价格也比单抗要低。 单抗制备流程图 应用的区别 单抗和多抗都有各自鲜明的特点与优势。单克隆抗体的特异性高，一旦制备成功就可以永续的生产完全一致的抗 体，因此可以对其特异性进行全面、系统地验证。但如果所识别的抗原表位被破坏，实验的结果将会受到很大的影 网址： 活性蛋白整体方案 响，这也是单抗的缺点之一。而多克隆抗体的特异性较差，即使是使用相同的抗原制备多抗，不同批次间也会存在 差异，因而在特异性、一致性方面有很大的局限。所以在用多抗做免疫检测时，更容易造成背景，例如在WB 中 有杂带，在IHC 中背景较深等等。虽然还存在着交叉反应*的问题，但由于多抗识别多个抗原表位，即使是有少数 几个抗原表位被破坏或者抗原构象改变，实验的结果也不会受到影响。在相同条件下，使用多抗可以提高检测的灵 敏度，对于丰度偏低的蛋白也更容易检出。 如果对抗体的特异性要求高，用量较大或需要长期使用一致的抗体，制备的抗体应用要求多 （WB/IP/IF/ICC等)， 可以选择制备单克隆抗体。若对抗体的特异性要求不高，需要做沉淀和凝集反应的检测性实验或者只需做ELISA 检测，可以选择制备多克隆抗体。 单抗、多抗比较表 多抗 单抗 对免疫原的要求 免疫原纯度越高越好 不纯的免疫原也能得到高纯度的 抗体 特异性 高（抗原亲和纯化） 高 稳定性 较好 相对较差，对理化条件敏感 标准化 较难，不同批次的抗体质量差异大 易于标准化，批次间差异小 识别 多表位 只有一个抗原表位 交叉反应 很常见，难避免非特异反应 不常见，可避免非特异反应 凝集反应 有 大多数没有 沉淀反应 有 大多数没有 成本 低 高 周期 短