一种快速有效的基因分型斑马鱼的方法为了促进斑马鱼的高通量的 .PDFVIP

一种快速有效的基因分型斑马鱼的方法 为了促进斑马鱼的高通量的基因分型，我们开发了一种新的技术——用高通量熔解分析 （HRMA ）区分野生、杂合、纯合突变。这种耗时一个小时的技术不需要进行限制性内切酶酶 切和琼脂糖凝胶电泳的操作。此技术生成的熔解图的敏感性高，可以检测不明确的PCR产物。 我们可以对斑马鱼的三种类型的突变进行可靠的基因分型，包括apchu745 （apcmcr ）和p53zy7 （p531166T ），小的缺失突变（bap28y75 ）及逆转录病毒的插入突变（wdr43hi821a ）。这种技术可 对单个斑马鱼胚胎及个体进行基因分型并适用于其它类型的生物体。Developmental Dynamics 238:3168-3174 ，2009©2009 Wiley-Liss ，Inc 。 关键词：熔解曲线 斑马鱼 基因分型 SNP 点突变 插入突变 简介 斑马鱼作为有机体遗传模型正在成熟。考虑到比较容易维持大量的突变线，且大量的鱼位 于每个突变线，大规模的基因分型需要有效的高通量的基因分型技术。突变的多种类型导致斑 马鱼突变，增加了基因分型的复杂性。ENU 诱变剂——诱导斑马鱼突变的主要物质，经常导致 单个