响应面法优化石榴皮中原花青素提取工艺.docVIP

响应面法优化石榴皮中原花青素提取工艺摘要：以原花青素提取液的吸光度（Ａ５５０ ｎｍ）为指标，在单因素试验的基础上运用响应面试验考察乙醇溶液体积分数、料液比、提取时间和提取温度对石榴（Ｐｕｎｉｃａ ｇｒａｎａｔｕｎ）皮中原花青素提取率的影响。结果表明，石榴皮中原花青素的最佳提取工艺为乙醇溶液体积分数７３％、料液比１∶２８（ｍ∶Ｖ，ｇ／ｍＬ）、提取时间７３ ｍｉｎ、提取温度８０ ℃，采用高效液相色谱法测得此条件下所得石榴皮中原花青素的提取率为１２６．６８ ｍｇ／ｇ。 关键词：石榴（Ｐｕｎｉｃａ ｇｒａｎａｔｕｎ）皮；原花青素；提取；响应面法 中图分类号：Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）17－3816-05 Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Oligomeric Ｐｒｏａｎｔｈｏ-ｃｙａｎｉｄｉｎｓ ｆｒｏｍ Ｐｕｎｉｃａ ｇｒａｎａｔｕｎ Ｐｅｅｌ Ｕｓｉｎｇ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｓｕｒｆａｃｅ Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ ＬＯＵ Ｂｉｎ，ＺＨＡＮＧ Ｎａｎ，ＹＯＵ Ｊｉａｎｇ－zｈｏｕ，ＬＩ Ｊｉｎｇ，ＫＡＮＧ Ｈｕｉ－mｉｎ，ＬＩＵ Ｘｉｎ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ， Ｃｈｅｎｇｄｕ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｃｈｅｎｇｄｕ ６１００８３，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ ｗａｓ ａｄｏｐｔｅｄ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｖｏｌｕｍｅ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ ｓｏｌｕｔｉｏｎ， ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｓｏｌｖｅｎｔ ｒａｔｉｏ， ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｙｉｅｌｄ ｏｆ oligomeric ｐｒｏａｎｔｈｏ-ｃｙａｎｉｄｉｎｓ（OPC） ｆｒｏｍ Ｐｕｎｉｃａ ｇｒａｎａｔｕｎ ｐｅｅｌ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｄｅｓｉｇｎ ｕｓｉｎｇ Ａ５５０ ｎｍ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｓ ａｎ ｉｎｄｉｃａｔｏｒ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ， volume fraction of ｅｔｈａｎｏｌ solution， ７３％； ｓｏｌｉｄ ｔｏ ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ １∶２８（ｍ∶Ｖ，ｇ／ｍＬ）， ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ， ７３ ｍｉｎ； ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ８０ ℃． Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ＨＰＬＣ ａｎａｌｙｓｉｓ， ｔｈａｔ ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ OPC ｕｎｄｅｒ ｔｈｅｓｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗａｓ １２６．６８ ｍｇ／ｇ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｐｕｎｉｃａ ｇｒａｎａｔｕｎ ｐｅｅｌ； oligomeric ｐｒｏａｎｔｈｏ-ｃｙａｎｉｄｉｎｓ； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ； ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ 原花青素（Ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｃ ｐｒｏａｎｔｈｏ-ｃｙａｎｉｄｉｎｓ，ＯＰＣ）是一种有着特殊分子结构的生物类黄酮，是植物中广泛存在的一大类多酚化合物的总称，主要由不同数量的儿茶素和表儿茶素的单体、二聚体、三聚体到十聚体组合而成。ＯＰＣ拥有较强的抗氧化能力、清除自由基能力和改善人体微循环等功效，还具有抗炎、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老、改善免疫力、改善骨的形成、抗糖尿病、降血脂、降血压，促进伤口愈合和组织修复活性等作用［１］。石榴皮是石榴科植物石榴（Ｐｕｎｉｃａ ｇｒａｎａｔｕｎ）的干燥果皮，性酸、味涩，具有涩肠、止血、杀虫等功效。近年来研究表明，石榴皮富含没食子酸、儿茶素和花色素等多种酚类化合物，具有抗氧化、清除氧自由基、抑制动脉粥样硬化和抗肿瘤等多种功能，在食品、医药和日用化学品等领域有巨大的应用价值［２－４］。本研究用恒温振荡仪提取石榴皮中原花青素，设计单因素试验考察乙醇溶液体积分数、料液比、提取时间和提取温度对石榴皮中原花青素提取率的影响，在此基础上采用Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ中心组合试验设计原理，利用响应面法对提取工艺进行优化并得出最佳提取工艺参数，旨在为石榴皮中原花青素的提取提供参考，为进一步开发利用石榴资源提供理论依据。 １ 材料与方法 １．１ 材料与仪器 石榴皮取自四川省会理县产软子甜石榴，购买于会理县城，剥取新鲜的石榴皮，置于４０ ℃干燥４８ ｈ，粉碎、过６０目标准筛、石油醚脱脂、阴干备用。 原花青素标准品（纯度≥９５％