和－nQai基因多态性.PDFVIP

遗 传 学 报，25(5):398-402,1998 ActaGeneticaSinica 用PCR-RFL方法研究藏族HLA-DQAI 和-nQai基因多态性 李 霞 张咸宁 郑其平 邵红光 刘 :fA 朱定良 庚镇城 复（旦大学遗传学研究所 上海 200433) 摘要 应用 目前HLA研究领域中成熟的、有效的PCR-RFLP基因分型技术，从DNA水平对藏 族健康群体进行了HLA-DQA1(49人）和一DQBI(49人）基因分型，这在国内外属[I次。所采 用的PCR-RFLP基因分型技术是在HLA-DQAI和一DQBI各等位基因全部序列已知的情况下， 对其第2个外显子碱基序列扩增进而进行RFLP分析的方法。这种方法得到的RFLP的所有 片段都是已知序列，因而精确度很高，同时为发现新的等位基因提供了成熟而有欢的分析方 法。研究结果表明，在藏族DQA1的8个等位基因，DQA1*0301的基因频率最高(36.74%). DQAI*0601(4.08%),*0103(4.08%）和 ＊0401(5.10%）最低。在DQBI的16个等位基因中， DQBI＊0302(16.33%),＊0303(15.31）和 ＊0602(15.31）为最常见，没有观察乓习＊05040 统计分析表明，在DQAI各等位基因分布上，藏族与新疆汉族、北方汉族、上海汉族十分相近； 与维吾尔族和哈萨克族也没有明显差异。在DQBI各等位基因的分布上，藏族少。飞丈族、维族、 哈族之间略有差异，而汉族、维族、哈族之间也存在一些差异。 关键词 藏族，PCR-RFLP,HLA-DQAI,HLA-DQBI 分类号 Q347 藏族是我国民族大家庭中的一员，据许多历史文献记载，早在几千年 卜前，藏族就和 汉族以及我国其他少数民族有着密切的交往和婚亲关系，藏语和汉语均属 z藏语系。西 藏医学界专家孙新甫和傅玉江与北京儿科研究所HLA实验室、中日友好伙院临床研究室 等单位合作，对拉萨、日喀则地区的400名藏族居民的HLA的研究表明，藏疾属中国北方 人群的一部分，起源于华北地区，从而为汉藏民族具有共同渊源提供了新的科学信息[1]［a 据我国第4次人口普查，藏族人口有459万2[1［，主要分布于西藏、青海、四川、甘肃、云南等 省，其中西藏 自治区是藏族的主要聚居地，全区藏族人口占全藏族人口的46,16%[31。藏族 是我国56个兄弟民族中的一员，地处西南边睡，交通不便，经济文化亦较落后。研究藏族 的多态性及其与疾病的关联性，将会促进藏族人民卫生保健事业的发展和}t}`进民族团结。 据支藏医务人员调查，在藏胞中，重症肌无力 M（G）的发病率是较高的。MCP是自身免疫性 疾病的一种，与人的白细胞抗原 (HLA）具有密切相关性，为了最终阐明藏族MG患者与 本文 于1997-01-13收到，1997-04-10修回 国家自然科学基金资助课题 (No 5期 李 霞等：用PCR-RFLP方法研究藏族HLA-DQA和一DQBI基VI}T态性 399 HLA基因间这种关联性，我们采用PCRRFLP技术对其HLA基因多扮性进行了研究，以 便为进一步研究藏族MG疾病关联性提供健康对照，同时通过与我1+1其他民族群体作比 较，探讨其进化以及与其他民族之间的亲缘关系。 I 材料和方法8-［101 1.1实验对象 为在青海居住3代以上、相互间无血缘关系的健康藏族人，共计钊例。其中男性受检 者为25人，女性受检者为24人。 1.2 基因组DNA的制备 用真空采血管N（ipora，日本）抽取静脉血5ml，依照Miller法抽提堪因组DNA. 1.3PCR扩增DQA1,DQBI目的基因6l［ 按照第 11届国际组织相容性会议 1（991)推荐的方法进行。变性、退火和延伸温度 DQAI分别为940C,56℃和72C;DQBI则分别为94C1,60℃和72.C。在DNA扩增仪 FR-800上海复日生物实验技术研制所）扩增32个循环。对PCR产物以12%PAGE进行 检测 D（QA1产物为242或239bp,DQBI为270bp) 1.4 RFLP分型7［,81 DQA1扩增产物分别用A