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前列冲剂大鼠灌胃给药长期毒性试验作者／张春和　林咏梅　陆　瑛　陈天波　秦国政　李焱风 摘要：目的：观察前列冲剂重复给药对试验动物所产生的不良反应。方法：用雄性SPF级SD大鼠80只连续灌胃给予前列冲剂6周，停药恢复2周的长期毒性试验，动物随机分为溶媒对照组和前列冲剂3.0、6．0、9.0g／kg体重3个剂量组，相当于临床成人拟用药量的20、40、60倍。于末次给药后24h处死约1／2动物进行血液学指标检查，血清生化指标检查，病理组织学检查。余下动物停药观察2周，检查指标同给药末期。结果：溶媒对照组和3个剂量给药组动物，体重增长，摄食量正常，未见明显毒性反应；血液学仅见停药期MPV组间比较有显著性差异(P＜0.05)，血清生化学所测指标停药期ALP、TP、ALB组间比较有显著性差异(P＜0.05／0.01)，但均在本研究历史背景资料范围；脏器、器官组织病理学检查未观察到与受试药物相关的病理组织学改变。结论：前列冲剂在本试验剂量范围条件下对SD大鼠未引起明显毒性反应，即3.0g／kg体重，相当于临床成人拟用药量的20倍以下为安全剂量参考范围。 关键词：前列冲剂；长期毒性；动物试验 中图分类号：R285．5　文献标识码：A 文章编号：1007－2349(2007)03－0038－02基金项目：国家高技术研究发展计划(863计划)创新药物与中药现代化重大专项博士基金项目(编号：2003AA223505) 作者简介：张春和(1968～)，男，四川南江县人，副主任医师，医学博士，主要从事泌尿外科、男科研究。 前列冲剂为临床使用多年的经验处方，经现代中药制备工艺提取精制而成，主要用于治疗良性前列腺增生症属肾虚血瘀膀胱气化功能失司者。为了对该药作出客观的安全性评价，笔者进行了前列冲剂大鼠灌胃给药长期毒性试验。 1　材料与方法 1．1药物与动物前列冲剂(由云南中医学院附属医院制剂中心提供，科研用药无批号)临用前用高压灭菌水配成0.3g，0.6g，0.45g／ml的混悬液。5～6周龄健康未交配SPF级雄性SD大鼠80只，体重140～180g(由昆明医学院实验动物中心提供)。 1．2主要仪器及配套试剂 ADVIA 60型全自动血球分析仪及配套试剂(测Hb、RBC、WBC、PLT、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW、MPV)；TMS－1024全自动生化分析仪及配套试剂(测G1u、AST、ALT、ALP、Crea、BUN、TP、ALB、T－CHO、T－Bil)；OLYMPUS BH－2显微镜；普通光学显微镜。 1．3方法 1．3．1剂量设计及分组根据临床成人(以60kg体重计)拟用药量0.15g／kg／d；ICR小鼠急性毒性试验的最大耐受量大于53.2g／40ml／kg。按《中药、天然药物长期毒性研究技术指导原则》的要求，设一个溶媒对照组和3个剂量组。80只大鼠随机分为4组，每组20只。溶媒对照组：高压灭菌水。低剂量组：3g／kg为临床成人拟用量的20倍。中剂量组：6g／kg为临床成人拟用量的40倍。高剂量组：9g／kg为临床成人拟用量的60倍。 1．3．2给药方法对照组、低、中、高剂量组均为10ml／kg体重等容量灌胃，高剂量组因给药容量大故每天灌胃2次。 1．3．3实验周期2005年11月11日～2006年1月11日，每周灌胃给药7d，连续6周，停药恢复2周。 1．4观察指标[1] 每天观察试验动物进食、饮水、活动等一般情况，异常反应或中毒症状，动物死亡数，中途死亡动物及时解剖进行肉眼观察和病理组织学检查，以便了解死亡原因。每周称量动物体重及进食量一次，根据体重变化调整给药容量。于末次给药后24h各组随机抽取约1／2动物采血进行血液学、血清生化检查，解剖，进行病理组织学检查，剩余动物停药2周恢复观察，检查指标同给药末期。 1．4．1血液学检测指标血红蛋白(Hb)测定、红细胞(RBC)计数、白细胞(WEC)计数及分类(％)、血小板(PLT)计数、网织红细胞(％)红细胞比容(HCT)、平均红细胞容积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞体积分布宽度(RDW)、平均血小板体积(MPV)测定。白细胞分类和网织红细胞采用手工推血片，显微镜计数。 1．4．2血清生化学检测指标血糖(Glu)、血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、肌酐(Crea)采用酶法。尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(T－CHO)、总胆红素(T－Bil)采用终点比色法。白／球比值(A／G)直接计算法。 1．4．3病理组织学检查指标解剖动物肉眼观察各脏器有无病变，取脑、