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慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA及病毒复制水平相关性研究[摘要] 目的:通过检测180例慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA和HBV-M含量,探讨不同类型慢性乙型肝炎患者病毒复制水平与HBV标志物(HBV-M)模式及肝损害程度的关系。方法:2000年8月~2003年8月我院传染科收治住院的慢性乙型肝炎180例,采用荧光定量PCR方法检测HBV DNA血清含量,同时检测HBV血清标志物及TBil、ALT、AST。结果:血清HBeAg阳性组HBV DNA含量(106.35±1.84)显著高于HBeAg阴性组(104.73±1.88)(P<0.01),而不同HBV DNA水平患者的TBil、ALT、AST差别无显著性(P>0.05)。结论:血清HBeAg的存在影响HBV DNA的水平变化,血清HBV DNA含量与TBil、ALT、AST水平无明显关系。
[关键词] 慢性乙型肝炎;乙型肝炎病毒核酸;定量聚合酶链反应
[中图分类号] R575 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2008)04(c)-021-02
我们采用荧光定量PCR方法检测2000年8月~2003年8月我院传染科收治住院的180例不同类型慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者血清HBV DNA基因含量,以探讨轻度、中度、重度慢乙肝患者与病毒复制水平之间的相关性。
1 对象和方法
1.1 对象
慢性乙型肝炎诊断符合2000年(西安)全国病毒性肝炎与肝病学术会议修订的诊断标准。其中,慢性乙型肝炎轻度80例,中度70例,重度30例;男性146例,女性34例,年龄5~60(平均30.7)岁,病程(6.0±5.4)年。
1.2 检测方法
HBV DNA基因含量检测采用美国Biotronics公司生产的荧光标记(AmpliSensor)HBV DNA定量试剂盒进行定量聚合酶链反应(PCR)检测,检测仪器采用美国Biotronics公司AG 9600荧光定量PCR分析仪,以<5×103 copies/ml为阴性结果。为便于统计,均以检测结果绝对值的对数值进行比较。HBV血清标志物(HBV-M)检测采用ELISA法,试剂由上海科华生物工程股份有限公司提供。血清TBil、ALT、AST测定采用美国BECKMAN COUTLER CX5PRO全自动生化分析仪测定,TBil>17.1 μmol/L、ALT>40U/L、AST>40 U/L为异常。所有检测均严格按照试剂说明书进行操作。
1.3 统计学处理
采用t检验及χ2检验。
2 结果
2.1 血清HBV DNA基因含量与HBV-M的关系
血清HBV DNA基因含量与HBV-M的关系见表1~2。
血清HBeAg阳性组HBV DNA阳性率与定量水平普遍较高,最高达8.9×1010 copy/ml,其基因含量明显高于HBeAg阴性组(t=5.34,P<0.01)。180例患者中有29.44%(53/180)HBeAg阴性,其中部分病例HBV DNA水平还较高,最高可达9.6×108 copy/ml。
2.2 慢性乙型肝炎血清HBV DNA基因含量与肝损害程度的关系
慢性乙型肝炎血清HBV DNA基因含量与肝损害程度的关系见表3。
与重度组比较,t=0.37,△Ρ>0.05;与重度组比较, t=1.23,△△Ρ>0.05
2.3 血清HBV DNA基因含量与肝功能的关系
血清HBV DNA基因含量与肝功能的关系见表4。
各组间比较无明显差异,TBil组t=0.34,1.27,1.13,Ρ>0.05;ALT组t=0.55,1.23,1.17,Ρ>0.05;AST组t=1.07,1.41,0.25,Ρ>0.05
3 讨论
既往报道血清HBeAg与HBV DNA定性检测呈良好相关性,而本文结果显示血清HBeAg阳性者HBV DNA基因含量明显高于HBeAg阴性者,从基因定量水平进一步证实了HBeAg确是反映乙肝病毒复制的良好指标,表明HBV DNA含量与HBeAg的存在有明显的关系,检测血清HBV DNA含量,能较好地反映HBV感染者的病毒血症水平和传染性强弱程度,与文献报道相同[1~4]。同时,本文研究表明其他各种HBV-M血清学模式均可检出不同程度的HBV复制,尽管它们的血清HBV DNA基因含量不尽相同。既往一般认为,血清HBeAg的消失或抗-HBe的出现预示HBV复制水平降低或病变恢复,而本文发现180例慢性乙型肝炎中有29.44%的病例血清HBeAg阴性,且部分的患者有高水平的HBV DNA,表明有活跃的病毒复制。对于血清HBeAg阴性、抗-HBe阳性,而HBV DNA高水平、肝功能异常的患者在临床上应引起
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