溶血标本对乙型肝炎表面抗原检测影响.doc

溶血标本对乙型肝炎表面抗原检测影响摘要：目的：分析溶血对乙型肝炎表面抗原检测的影响。方法：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)。结果：溶血标本采用ELISA法检测HBsAg易产生假阳性或假阴性。结论：溶血标本影响乙型肝炎表面抗原的测定结果，溶血标本一般不宜做乙型肝炎表面抗原的检测。 关键词：溶血；乙型肝炎表面抗原ELISA 中图分类号：R512.6+2　文献标识码：B　文章编号：1008－2409(2007)04－0810－02 乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的检测是诊断乙型肝炎的主要指标。随着检测技术的不断发展，ELISA一步法检测HBsAg的试剂、方法均已成熟．因其方法简便、灵敏度高、特异性强、实验要求条件不高，而被各级各类医疗机构广泛采用m。通常检测时要求空腹采集标本，不能溶血，但实际工作中会因各种原因造成标本溶血，由于溶血标本中非特异性物质对实验的影响，致使实验结果出现假阳性或假阴性。为此笔者对溶血标本影响HBsAg结果的因素进行分析。 1　材料与方法 1.1　标本 50例健康者标本和50例乙型肝炎表面抗原患者标本。先分别吸取50例健康者标本和50例乙型肝炎表面抗原患者标准血清各1份，再采用冰冻法使这100例血标本溶血，再取血清各1例。 1.2　试剂 英科新创(厦门)有限公司试剂盒的说明书操作及判断标准进行检测HBsAg。 1.3　操作 严格按照试剂盒所提供的操作说明书步骤进行。 2　结果 50例溶血状态下健康者标本HBsAg检测结果：阴性为21例，阳性为29例；50例溶血状态下乙型肝炎患者血清HBsAg检测结果：阴性为1例，阳性为49例。 标本在溶血和无溶血状态下检测HBsAg的结果见表1，表1显示阴性溶血标本检测HBsAg的阳性率为58％，而阳性溶血标本对实验无明显影响。 3　讨论 实验表明，溶血标本采用ELISA法检测HBsAg易产生假阳性。分析其原因可能是溶血血清中含有过氧化物酶物质(红细胞或血红蛋白中的亚铁血红索)，在洗涤过程中往往难以完全洗脱，它可使H2O2释放出原生态氧，从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质，即显蓝色，使HBsAg产生假阳性。众所周知，溶血的原因有许多，主要分体外溶血和体内溶血两种。体外溶血可由物理因素(如机械性破坏、冰冻)、化学因素(如血样接触表面活性剂)和代谢性因素(如遗传病引起的血细胞脆性增加)引起。体内溶血则可由物理因素(人工心脏瓣膜或大血管手术后)、生物因素(如恶性疟疾)和药物毒性反应等因素引起。 实验表明，溶血标本不宜做乙型肝炎表面抗原的检测。溶血的标本在临床上通常被认为“不合格”，按要求应退回重新采样，这就造成工作上的许多不便，增加了患者的痛苦，也延误了患者的治疗。为此，作为医务人员应严格避免人为因素导致溶血的发生，要从标本、检测过程、试剂、设备、方法的选择都做到认真负责。 溶血标本可使未感染过乙型肝炎病毒的健康者造成HB．sAg假阳性，给临床诊断治疗带来干扰。建议在ELISA法检测HBV标志物时应适时改进洗板机功能，增强洗涤力，尽量排除洗涤后残留的液体，以减少非特异性物质的残留，克服其对检测结果的影响。另外，溶血标本检测HBsAg时可用二步法来进行，一是可先将血清洗涤掉，致使残留的过氧化物酶的含量进一步降低，二是经过二次洗涤大大降低了残留的可能性，降低发生假阳性的概率，保证了实验的正确性。 [责任编辑　高莉丽　邓德灵] 1