血细胞研究仪测定血小板时假性减低因素.docVIP

血细胞研究仪测定血小板时假性减低因素[摘要]目的：探讨血细胞分析仪测定血小板时造成假性减少的因素，为临床提供可靠的诊断依据。方法：采用仪器法，分别在不同的待测时间对200例静脉标本进行测定，观察其数值变化；结合直方图，以手工法作血小板计数进行比较。结果：200例标本的仪器测定结果中，171例测定结果血小板直方图出现电子拟合曲线，0、15 min测定结果与手工法比较有显著性差异，而30、60、120 min测定值比较无显著性差异；仪器法0、15、120 min与30、60 min测定值有显著性差异。29例标本的测定结果未出现拟合曲线，与手工法比较有显著性差异。结论：仪器法测定血小板时，最佳测定时间为采血后30～60 min，以不超过120 min为宜；未出现拟合曲线的标本需手工法复查，降低血小板假性减少的情况发生，为临床提供可靠的数据。 [关键词]血细胞分析仪；血小板计数；影响因素 [中图分类号]R446[文献标识码]B[文章编号]1673-7210（2007）02（b）-068-02 COULTER STKS系列血细胞分析仪是利用电阻抗原理计数血小板，其临界值为2.0～20.0 fl，而对其临界值以外的血小板则根据正常人血小板体积正态分布的理论，通过0～70 fl的电子拟合曲线，将这些异常大小的血小板估计计入。由于具有快速、方便、重复性好、工作效率高等特点，COULTER STKS系列血细胞分析仪已被医院检验科广泛使用。但由于各种原因造成血小板检测结果假性减少的情况时有发生。本文将对工作中造成血小板计数假性减少的原因进行探讨。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 仪器COULTER STKS 全自动五分类血细胞分析仪，Olympus双目显微镜，EDTA-K2真空抗凝管。 1.1.2 试剂仪器进口配套试剂，草酸铵稀释液（按《全国临床检验操作规程》配制）。 1.1.3 标本2006年3月~5月本院住院患者血常规检验标本120例，门诊标本80例。 1.2 方法 对200例病人标本分别于0、15、30、60、120 min进行机测，观察结果的变化；根据血小板直方图电子拟合曲线的情况，分别进行手工计数作比较。 2 结果 正常情况下，血小板计数仪器法与手工法结果一致[1]。 但在不同混匀时间的情况下，血小板两种方法测定的结果有所差异，且在0、15 min仪器法与手工法比较差异明显；另外，0、15、120 min仪器测定的结果与30、60 min测定的结果亦有显著性差异（表1）。 表1直方图出现电子拟合曲线的标本不同混匀时间两种方法测定结果 仪器测定血小板时，血小板直方图通常情况下会出现一条拟合曲线。当血液中血小板形态异常时，直方图中并未出现拟合曲线，此时血小板计数仪器法与手工法比较有明显差异（表2）。 表2直方图未出现电子拟合曲线的标本不同混匀时间两种方法测定结果 3 讨论 3.1 一定浓度的EDTA-K2作抗凝剂络合了血液中的钙，使血液抗凝。血液标本与抗凝剂混匀时间对结果影响很大。EDTA-K2会使血小板形态发生变化，其外膜形成的微小管游离端向外伸展，从而在血小板周围形成丝状伪足，数个这样的血小板伪足相互缠绕，形成血小板可逆聚集体，由于仪器只识别颗粒大小而不区分颗粒性质，且血小板与红细胞计数在同一通道进行，致使这些血小板被误认为是小红细胞而不纳入血小板计数范围，这就是血小板混匀时间在0、15 min仪器法较手工法显著偏低的原因。随着时间延长，EDTA能使血小板由盘状变为球状，血小板伪足回缩到胞质内，相互缠绕的血小板解散[2]，血小板的计数较0、15 min的测定值高。实际操作中，由于急需报告而使待测时间缩短，往往导致血小板结果偏低。而血标本混匀超过60 min后，血小板会因离体时间太长，发生变形、自溶、体积变小，或黏附聚集和破坏，致使计数减少。所以，血小板测定的最佳时间为抽血后30～60 min，而且最迟应在120 min内完成，以避免由于混匀时间过短或过长导致血小板假性减少的情况发生。 3.2 表1与表2比较结果显示，171例标本仪器法与手工计数结果大致相符，血小板直方图形状正常，有明显的主峰；29例结果仪器法与手工计数结果则有明显差异，血小板直方图有多峰出现，分布低而宽，部分图形尾巴上翘。这是因为采用电阻抗原理计数血小板的COULTER STKS系列的血球仪，为防止20 fl的小红细胞及其他细胞干扰，仅将2.0～20.0 fl血小板直接计入，而对其临界值以外的血小板则无法通过直接计数计入，只能根据健康人血小板体积符合正态分布的理论，通过0～70.0 fl的电子拟合曲线，将这些异常大小的血小板估计计入，由于仪器受此原