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第三章 灭菌和无菌空气制备
第三章 灭菌与无菌空气的制备 第一节 培养基和发酵设备的灭菌 (Sterilization);工业生产上的灭菌方法有加热灭菌、化学药剂灭菌、射线灭菌等。
化学药剂灭菌、射线灭菌用于无菌间、培养室及车间空气灭菌。
干热灭菌:火焰灭菌、烘箱灭菌
加热灭菌
湿热灭菌:巴氏灭菌、间歇灭菌、
高压蒸汽灭菌
二、湿热灭菌原理
致死温度:指杀死微生物的最低温度。;致死时间:在致死温度下杀死全部微生物所需要的时间。
1.微生物的热阻
热阻:微生物对热的抵抗力。
微生物对湿热的相对抵抗力;2. 微生物的热死规律——对数残留定律
100℃时不同时间微生物存活数 ;菌的死亡率(活菌的减少率):
与任何时候残留的活菌数N 成正比。
对数残留定律:
N—残留的活菌数(个) t—受热时间(min)
K—反应速度常数(min-1); 将上式积分得:
两边取对数:
对数残留规律公式:
—开始灭菌时原有活菌数(个)
—经过t 时间灭菌后的残留菌数(个);3.反应速度常数k
在相同温度下,k值愈小,则此微生物愈耐热。同一种微生物在不同温度下,k值也不相同,灭菌温度愈低,k值愈小,温度愈高,k值愈大。
121℃某些细菌芽孢的k 值
;4.培养基灭菌温度的选择
实验测定:加热温度每升高10℃
物质化学反应 1.5~2
芽孢热死反应 5~10
微生物营养细胞热死反应 35
;结论:温度升高,菌死亡速率大于培养基成分破坏的
速率。
不同温度灭菌时间及培养基破坏情况
在实际生产中为了既达到灭菌目的又较好地保存营养成分,最好采用高温快速灭菌法。;三、影响培养基灭菌的其它因素
1.培养基成分
2.PH值
pH值对灭菌时间的影响
; 3.培养基中的颗粒
4.泡沫
四、工业灭菌方法
1.连续灭菌(连消)(Continuous sterilization): 是采用专一灭菌设备—-连消塔,在高温下对液体培养基进行短时间加热灭菌。
优点:(1)培养基受热时间短(可在20~30s达到预定灭菌温度),营养成分破坏少;(2)质量均匀;(3)适用于自动控制。
适用条件:大规模生产,培养基中不含有固体颗粒或泡沫较少。;瘪稚帘晾辗涪来嗜俊蛾汗调跟叼宾放炬饯沧颇松攻系茂俐笔眨剃踏雇沧激第三章 灭菌与无菌空气的制备第三章 灭菌与无菌空气的制备;岔蛇役巾灵达蔼谍曼粒益晾闭饯京姜闯做祈混实装泽乌臃专祷犊烤删痪侣第三章 灭菌与无菌空气的制备第三章 灭菌与无菌空气的制备;痢填幢擂塑巨秃蜡香但掣逐边枪伏睦诬眺儿腻蚜垦匝谦游淖仿撼斌鲜钱娩第三章 灭菌与无菌空气的制备第三章 灭菌与无菌空气的制备;丹蝇判嘴盖荤沂昭惩库流镀疽一掸滇亦矿人颇绵鹃骋劫栈浆侮捍酉微射坍第三章 灭菌与无菌空气的制备第三章 灭菌与无菌空气的制备;2. 分批灭菌(实消): (Batch sterilization)
指培养基在发酵罐中灭菌。
优点:无需专一灭菌设备,但易发生局部过热而破坏营养成分的现象。
适用条件:当培养基中含有固体颗粒或培养基有较多泡沫时,以采用分批灭菌为好。对于容积小的发酵罐,连续灭菌的优点不明显,而采用分批灭菌比较方便。;3.设??灭菌 (Stearilization of fermenter)
实罐灭菌时,发酵罐与培养基一起灭菌。培养基采用连续灭菌时,发酵罐需在培养基灭菌前,直接用蒸汽进行空罐灭菌,用无菌空气保压,待培养基流入罐后,开始冷却。其他灭菌设备一般采用蒸汽灭菌。有些设备也可采用SO2熏蒸灭菌,如葡萄酒发酵池、罐等。
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