掺锶羟基磷灰石对成骨细胞增殖、分化和矿化影响.pdfVIP

掺锶羟基磷灰石对成骨细胞增殖、分化和矿化的影 响 中文摘要 目的：通过比较掺锶羟基磷灰石(Sr-HA)生物陶瓷与纯羟基磷灰石(HA)生物 陶瓷对体外培养成骨细胞的增殖、分化和矿化的影响，探讨掺锶羟基磷灰石对骨 形成的作用机制，为今后生物材料的研发和改进提供理论指导。 方法：采用酶消化培养法，从SD大鼠颅骨原代分离培养成骨细胞，并经鉴定、 纯化和传代。制备Sr-HA生物陶瓷粉末(含锶量分别为1％，5％和10％)与纯HA 生物陶瓷粉末四组材料浸提液，并测定浸提液的锶含量，将四组材料浸提液与 SD大鼠第三代成骨细胞共培养。用MTT法检测材料浸提液对大鼠成骨细胞增殖 的影响，用碱性磷酸酶活性测试盒测定浸提液对大鼠成骨细胞碱性磷酸酶(ALP) 活性的影响，用逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)分析SD大鼠成骨细胞特异转录 因子：核心结合因子(cbfal)基因的表达情况，用茜素红染色法测定SD大鼠成骨 细胞矿化结节形成情况。 结果：ALP的活性测定结果显示：细胞培养第3天，各培养组的,aLP活性无明 显差异(P0．05)；随着时间的延长，各培养组的．ALP活性均有增加；细胞培养 显著(P0．05)。应用RT-PCR技术分析cbfalmRNA的表达情况：在相同时间点， Sr-HA组cbfal mRNA表达均较纯HA组增加，且差异极显著(PO．01)，其中， 以5％Sr-HA组cbfal mRNA数据最高，但与10％组比较，差异不显著(PO．05)。 矿化结节计数结果显示：细胞培养第14，21天，不同掺锶量的Sr-HA均能促进 成骨细胞矿化结节的形成，与纯HA组比较，差异均极显著(PO．01)，其中， 5％Sr-HA组的差异最为显著(P0．01)。而细胞增殖结果则显示：各组材料浸提 液对成骨细胞的增殖无明显差别(P0．05)。 结论：Sr-HA与纯HA相比较，能上调成骨细胞cbfalmRNA的表达，促进成骨细 胞分泌碱性磷酸酶，从而促进成骨细胞的分化、矿化，促进骨形成，具有良好的 4 生物学特性，是一种良好的骨折内固定和骨填充修复材料，具有广阔的临床应用 前景。 关键词： 锶 羟基磷灰石 成骨细胞 增殖分化矿化 5 Effectsof on strontium—containinghydroxyapatiteproliferation， differentiationand mineralizationofosteoblastsinvitro Abstract ofthisinvitro wasto objective：The purpose study compare onthe hydroxyapatite(sr—HA)bioceramic、)~rim effectsthe andmineralizationofosteoblastcells， uponproliferation，differentiation themechanismofSt-HAonbone therebyexploring formation，thustoprovide theoretical tofurther and of guidance investigation,developmentimprovement materials． biological osteoblastswereculturedfrom Methods：Primary