脑缺血后移植骨髓神经组织定向干细胞的分布与分化.PDF

Med J Chin PLA, Vol. 37, No. 11, November 1, 2012 　861 脑缺血后移植骨髓神经组织定向干细胞的分布与分化 李琳，张兴秀，王健，姜容，郑敏 [摘要]　目的　观察骨髓神经组织定向干细胞(NTCSCs)经静脉移植后在脑缺血大鼠脑内的分布和分化情况。方法 　采用DMEM/F12(1 :1)无血清神经干细胞条件培养基，从SD大鼠骨髓中分离、培养NTCSCs ，应用免疫组化法对所获 β 细胞及其分化情况进行鉴定，RT-PCR检测Nestin 、CXCR4 、CD31 、 Ⅲ-tubulin及GFAP mRNA 的表达水平。采用改良 Zea-Longa线栓法制作SD大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型，造模成功24h后经尾静脉注射1ml DAPI标记的NTCSCs 。移 植后第1、3 、5 、7d处死大鼠，制备脑组织冰冻切片，荧光显微镜观察NTCSCs在脑组织的分布，激光共聚焦显微镜观 察NTCSCs 的分化情况。结果　分离培养获得的NTCSCs在神经干细胞培养条件下形成神经球，并表达神经干细胞标志 β GFAP 阳性细胞；RT-PCR检测结果显示NTCSCs 表达Nestin 、 巢蛋白Nestin及SDF-1受体CXCR4 ，可分化成 Ⅲ-tubulin 、 β CXCR4 、CD31 、 Ⅲ-tubulin 、GFAP mRNA 。静脉移植后NTCSCs 能够进入大鼠脑内，移植后第3天观察到DAPI标记的 NTCSCs主要分布在缺血损伤部位，第7天时有少量NTCSCs分化为GFAP 阳性细胞。结论　分离培养的NTCSCs具有神 经干细胞特性，移植后可能进入缺血脑组织，部分细胞表达GFAP 。 [关键词]　骨髓；神经组织定向干细胞；干细胞移植；颅内栓塞 [中图分类号]　R743.32 [文献标志码]　A [文章编号]　0577-7402(2012)11-0861-05 Distribution and differentiation of transplanted neural tissue committed stem cells to the brain after ischemic stroke 1 2 2 1 1* LI Lin , ZHANG Xing-xiu , WANG Jian , JIANG Rong , ZHENG Min 1Stem Cell and Tissue Engineering Lab, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China 2Department of Neurology, Second Affiliated Hospital of Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China * Corresponding author, E-mail: zmdwj625@ This work was supported by the Natural Science Foundation of China , and the Natural Science Foundation of Chongqing Science and Technology Commission (CSTC2010BB5096) [Abstract]　Objective　To investigate the distribution and differentiation of neural tissue committed stem cells (NTCSCs) by venous transplantation to the brain after middle cerebral arter