试验一洋葱根尖有丝分裂标本的制作与观察.PPT

遗传学实验教案 实验一 一、教学基本要求： 1.掌握植物染色体压片法 2.掌握有丝分裂各时期的特征。 3.掌握用秋水仙素诱发多倍体的一般方法 二、教学内容： 1、 洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察 〖目的和要求〗 本次实验通过对植物根尖的制片和观察, 要求学生初步学会对植物组织、细胞的固定、离析和压片方法，了解有丝分裂的全过程及其染色体的动态变化情况,掌握有丝分裂各时期的特征。 〖实验原理〗 有丝分裂是细胞均等增殖的过程, 是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中.细胞内每条染色体都能复制一份, 然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目,形态和性质上均是相同的，在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。分生组织→固定→解离→染色→压片→观察（间期、前期、中期、后期、末期） 〖材料和方法〗 洋葱或大蒜或种子根尖 水浴锅、显微镜 、恒温箱 卡诺氏固定液、石炭酸品红（或醋酸洋红）染色液，1N盐酸（或0.5%果胶酶+纤维素酶）,秋水仙素（0.1%） 1、取材：大蒜、洋葱根尖；2、预处理：药物处理（秋水仙素）或冷冻处理（冰箱）；3、固定：卡诺氏固定液；4、解离：恒温水浴锅，1N盐酸或0.5％的果胶酶和纤维素酶；5、染色及压片：染色液（改良苯酚品红或醋酸洋红），载玻片、盖玻片；6、染色体观察：显微镜 ；7、永久封片（示范）：二甲苯、中性树胶 。 〖步骤〗 1、取材：培养→（预处理）→切取（在分裂高峰期） ； 2、固定：卡诺氏固定液12-24小时→70%的酒精中保存 ； 3、解离：水洗→盐酸60℃ 8-10分钟解离→水洗 ； 4、染色：切取分生区→吸水→染色液一滴，15分钟→分割、压片，镜检 。 〖作 业〗 1、绘出所观察到的有丝分裂图象，并注明时期。 2、预处理与未预处理的分裂相有何不同为什么？ 2、植物多倍体人工诱导 〖目的和要求〗 通过这一实验，要求进一步了解人工诱导多倍体的原理，并初步掌握用秋水仙素诱发多倍体的一般方法 。 〖实验原理〗 植物多倍体是指每个细胞内染色体组有三套以上的植物。人工诱发多倍体的方法有很多，本实验利用秋水仙素抑制纺缍丝的形成，使得染色体复制后不能向两极移动，同时细胞也不分裂，从而形成多倍体的原理，用适当浓度的秋水仙素处理洋葱或大蒜根尖，待根尖膨大后制片观察，可发现多倍体细胞。 〖材料和方法〗 1、材料：大蒜或洋葱根尖，玉米种子，植物幼苗。 2、仪器和药品：显微镜，秋水仙素。 3、基本方法：①大蒜或洋葱根尖的处理，玉米种子的处理，植物幼苗的处理。②按照植物有丝分裂实验进行染色体制片观察。 〖作 业〗 绘制四倍体细胞染色体在有丝分裂中期的图像，比较与二倍体细胞的异同。 间期 两次细胞分裂之间的时期, DNA复制分为三个时期：复制前期（G1期）复制期（S期）、复制后期（G2期），该时期一般看不到细胞核中的染色体。 前期 染色体开始螺旋化，每个染色体由两个相同的染色单体组成，两者紧密相连（光镜下很难区别），细胞核呈线团状。 中期 核膜破裂，核仁消失，染色体排列在赤道板上，此时最有利于对染色体进行观察和计数。 后期 纺锤丝变短，每两个并列的染色单体分开，分别移向两极。 末期 两个染色单体在两极重新组成核，此时核膜核仁重新组成，染色体解旋，两个子核形成后细胞质开始分裂，两个子核间残留的纺锤丝形成细胞板，细胞膜，最后形成将母细胞分成两个子细胞，此时细胞分裂结束。 各时期 本图集中了细胞分裂各个时期的细胞 * * 1、 洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察 2、植物多倍体人工诱导（３学时）