锡嘴雀延脑发声中枢注人HRP对上位脑.PDFVIP

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锡嘴雀延脑发声中枢注人HRP对上位脑

动物学杂志 Chi~.eseJom I】ofZoo]ogF 锡嘴雀延脑发声中枢注人 HRP对上位脑 细胞标记的研究 。 曾庆 华 蓝 书成 (东北师范大学生物系,长春,130024) 摘要 在雌、堆锡嘴雀 (~oeeod~reu.tsf。f州 ^ f)的延脑发声中枢中间棱 (IntermedlusInk- c1邮 ,zM),注入辣根过氧化物酶 (Horaeradishpecoxldsse,HRP),标记上位脑控制发声棱团有原绞 状体粗校 (Nucltu~robustu~srchlstriatali*,RA)和背中拨 (Nucleusdersalismediali*,DM)。 其中 RA双侧被标记,井有明显的左侧优势,特别是在雄性鸟中这种优势更为突出。 近年来,有些学者 “^ 对鸟类与发声有关 的脑神经核团进行了一定的研究。 蓝 书成在 1958、l962年刺激了鸟类中脑引起鸣叫及植物 性反应 ,又用锡嘴雀的气管鸣管支 (Troche— osyriingeal,tO 浸泡 HRP24—48小时后,主 要在 1M 核获得标记细胞证明控 制锡 嘴雀 的 图 1 HRP 在 IM 内的扩散范围 黑点示 HRP nX: 1M 核是延脑控制发声的主要核 团 。 但还未 弟 l0代驻神精拨 ;nXIl:第 12代脑神精核 见有锡嘴雀 IM 核与上位脑发声中枢及各中枢 间的联系等问题的报道。在锡嘴雀延脑发声核 的 O.1mo]/L磷酸缓冲蔽)4℃,8Dml,然后剥 1M 注入 HRP继续追踪在 中脑和大脑 内发 声 去颅顶骨用基础平面切割仪 将脑切成冠状 基 相 关棱团的标记。 础平面 ,取脑在 固定液 中固定 4—8小时后 ,移 人 20弼 蔗糖磷酸液置 4℃ 冰箱过夜。 然后做 材 料 和 方 法 球冻切片 ,隔 片取 l,片 厚 40—5O m,按 本实验选用成年锡嘴雀 36只( 19、早i7) TM 反应 ,明视野显微镜观察标记细胞井用 用氩基 甲酸己酯1克/公斤麻醉后 ,将头 固定在 测微尺测量标记核 团大小。用金属微 电极刺激 鸟头固定仪上,参照 Stokes(I974)金丝鸟脑 RA.DM 核 ,5I起发声反应后迅速将动物作颈 图谱定位 ,微玻璃管尖端吸人 4O弼 浓度的HRP 动脉灌流,固定 ,冰冻切片 ,明视野下观察到电 溶液 (SigmaV1HRP溶解在 0.1mol/LpH 极在 RA DM 核的中心位置。电极尖端直径 8.3的 T}is—Hcl缓冲液中) 0.05 1分别注入 6一 l0 “m,电阻 1.2一1.5兆欧。 IM 核(雄 l5,雌 l3。左 l5,右 13),通过调节 结 果 电子步进器可准确地控制注入 HRP的量和速 度。 注射点均在 IM 中心,注射的 HRP扩散 (一)RA 的形态及定位 在 36只动物 均未超 出 IM范围(见图 1)。动物存活 39—48 (雄 I5只,雌 l3只。左 l5只,右 l3只)的 1M 小时,颈动脉灌流 ,其 中生理盐水 42℃,80ml, 固定液 (1.25,刍戊二醛 ,i弼 多聚 甲醛 pl-I7.4 中层科学院科学基盘资助的课题 (19s6) 核位于原纹状体腹部边缘 内侧 ,被标记的核团 能是种属 间实际差异 (见图 4)。 关于 RA 到 呈长椭圆形,在雄性左侧 RA标记细胞平均 100 IM 双侧投射经 由的路线和方式 ,在我们正在进 个。锡嘴雀具有鸣啭的机能,可能与发声核 团 行的实验 中证 明,由 RA 发 出的纤维 中脑后束 RA 发达有关。 Nottebohm 1982用金

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