反义RNA介导的抗猪传染性胃肠炎病毒感染.pdfVIP

中回惑学c丕攉第21卷第8期2005年8月 墼墼匡壑酱 业丝坐塑!兰型：唑! ：!!： 反义RNA介导的抗猪传染性胃肠炎病毒感染 于晓龙 (黑龙江省农业科学院畜牧研究中心，哈尔滨150086) 摘耍：构建了重组逆转录病毒表达质粒p]．xas—N。该质粒能表达互补猪传染性胃肠炎病毒N基因全 m1)筛选出稳定的产毒细胞克隆。分别扩大培养细胞克隆。取其上清液感染小鼠成纤维细胞NIH3T3， 测定细胞克隆产生的重组病毒滴度，并用高滴度重组病毒感染IBRS2细胞。提取被感染的IB险细胞 细胞产生的病变。结果表明该反义RNA对病毒的复制有抑制作用。其抑制率近50％。 关键词：反义RNA；猪传染性胃肠炎病毒：逆转录病毒载体；细胞病变 AntisenseRNA—MedidiatedResistancetoTGEVInfectionIn Cells IBRS2 Yu Xiaolong Animal ResearchCenter (The Husbandry ofAgriculturalSciences，Habin150086) ofHei如ngfa增Academy Abstract：Arecombinant to antisenseRNA to expressionplasmid，plxas-N，wasdesignedproduce targeted full of of was theN Transmissible virus transfected length swine，TGEV．鸭e gene gastroenteritis plxas-N into ceilslinePA317with viral oftheclonesselectedwithG418 packaging Lipofectamine．Thesupenatants fibre viral Was toin- detectedmurinecellNIH3T3．ne titer used (500p+g／m1)wereby highest pseudovims feet cell．TotalcellularRNAfromthe cell。andRT—PCR indicatedthatthe IBRS2 IBRS2 analysis pkas-N of hadinsertedintothe of theantisenseRNAWasevaluated IB险cell．Antiviral genome activitity