肝水解肽注射液标准草案.PDFVIP

附件： 肝水解肽注射液 Ganshuijietai Zhusheye Heparolysate Injection 本品系由健康牛、猪的肝脏经酶水解提取制得的含有多肽类、 氨基酸、核酸类物质（没有具体方法的话建议去掉）的无菌水溶 液。含多肽以牛血清白蛋白计，应为标示量的90.0% ～125.0%。 【性状】 本品为微黄色至淡黄色或淡黄棕色的澄明液体。 【鉴别】 (1) 取本品2ml，加茚三酮试液1ml，加热煮沸， 应显紫色。 (2) 取本品1ml，加3，5 二羟基甲苯溶液（取3，5 二羟基 甲苯0.4g，加0.1%三氯化铁盐酸溶液100ml 使溶解，即得）3ml， 在水浴中加热20 分钟，溶液应显绿色。 (3) 取本品，加水制成每 1ml 中含0.06mg 的溶液，照分光 光度法（中国药典2000 年版二部附录Ⅳ A ）测定，在250nm（猪） 或264nm （牛）波长处有最大吸收。 （3）在水解氨基酸及游离氨基酸检查项下记录的色谱图中， 游离氨基酸供试品溶液应具有与谷氨酸、甘氨酸、苏氨酸、丙氨 酸、缬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸及赖氨酸对照品相同 保留时间的色谱峰；水解氨基酸供试品溶液应具有与天冬氨酸、 谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、苏氨酸、丙氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、 异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、羟脯氨酸及脯氨酸对照品相同保留 时间的色谱峰。 【检查】 pH 值 应为5.5 ～7.5 （中国药典2010 年版二部 附录Ⅵ H ）。 溶液的澄清度与颜色 （建议增加，限度请各企业提建议） 蛋白质 取本品 1ml，加20%磺基水杨酸溶液，混匀，不得 发生浑浊。 高分子量物质 取本品适量，加水制成每1ml 中含2.5mg 的 溶液，作为供试品溶液；另取细胞色素C 注射液适量，加水制成 每1ml 中含1mg 的溶液，作为对照溶液。照高效液相色谱法（中 国药典2010 年版二部附录Ⅴ D ）测定。采用凝胶色谱柱（如TSK gel G 2000 SW ）；以磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钾 13.93g、磷 酸二氢钾5.32g，氯化钠5.84g，加异丙醇50ml，加水至1000ml， 用磷酸调pH 至7.0 ）为流动相；检测波长为280nm。取对照溶液 与供试品溶液各20 μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供 试品溶液色谱图中，各峰的保留时间均应大于对照溶液主峰的保 留时间。 渗透压摩尔浓度 取本品，依法检查（中国药典 2010 年版 二部附录 Ⅸ G ），渗透压摩尔浓度的限度再订。 水解氨基酸及游离氨基酸 游离氨基酸供试品溶液的制备： 取本品，用水适当稀释，混匀，即得。水解氨基酸供试品溶液的 制备：取本品1ml，加7mol/L 盐酸溶液5ml，110℃水解16 小时； 将水解液全部转移出来，蒸干，精密加入 5ml 水复溶，用 0.45 μm 的滤膜滤过，取续滤液即得。对照品溶液的制备：取天冬氨 酸、谷氨酸、丝氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、甘氨酸、苏氨酸、胱 氨酸、丙氨酸、精氨酸、酪氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、色氨酸、 苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、羟脯氨酸和脯氨酸对照 品各适量，用水制成每1ml 中含各种氨基酸约为0.15mg 的溶液。 用适宜的高效液相色谱仪进行分离测定，水解氨基酸的浓度减去 游离氨基酸的浓度不得少于9.0mg/ml。 活性 取本品，照活性测定法（附件一）测定，应符合规定。 热原 取本品，依法检查（中国药典 2000 年版二部附录Ⅺ D ），剂量按家兔体重每1kg 注射0.5ml,应符合规定。 细菌内毒素 取本品，依法检查（中国药典 2010 年版二部 附录Ⅺ E 细菌内毒素检查法)，每ml 中含内毒素的量应小于10 EU。 过敏试验 取本品，加氯化钠注射液制成每1ml 中含2mg 的 溶液作为致敏液及供试品溶液，依法检查（中国药典2010 年版 二部附录XI K ），应符合规定。 异常毒性 取本品，以氯化钠注射液按 1 ∶2 稀释配制成供 试液，依法检查（中国药典 2010 版二部附录XI C ），应符合规 定。 降压物质 取本品，加氯化钠注射液制成每1ml 中含0.5mg 的溶液，依法检查（中国药典2010 年版二部附录Ⅺ G ），剂