医学论文范文：2类水产动物抗菌肽之重组表达技术改进及药理药效分析.docVIP

　　医学论文范文：2类水产动物抗菌肽之重组表达技术改进及药理药效分析 --第一章绪论 1.1前言 近年来伴随着代写论文水产养殖业的迅猛发展，由细菌、病毒等引起的水产动物病害也呈现上升的趋势，造成了严重的经济损失，因而水产动物的病害防治已经成为制约养殖业发展的主要问题。使用抗生素虽可部分地解决这一问题，但大量使用抗生素，会破坏养殖水环境和养殖动物体内的微生态平衡，导致某些病原菌产生耐药性，进而对人类的健康构成潜在性威胁。同时，水产动物的药物残留已成为水产品出口创汇的主要瓶颈。因此，为了人类的健康和水产养殖业的可持续发展，一方面对部分抗生素进行结构改造或重新研制新药以提高疗效；另一方面去探索或寻找某些高效、无毒副作用、无残留的抗生素替代物。据目前研究现状分析，抗菌肽的发现与应用是向抗生素替代物应用研究方向迈出的可喜一步。今后，随着社会对“放心”、“绿色”产品需求的大幅度增加，抗菌肽新产品的研发与在养殖业上推广应用前景将会更加广阔。 1.2抗菌肽的定义 抗菌肽（antimicrobial peptides）是在诱导条件下，由机体细胞产生的用于对抗外源性致病菌的一种活性多肽。这种多肽广泛地存在于细菌、真菌以及动植物体内，有抗细菌、真菌、病毒、肿瘤以及原虫的作用。 1.3抗菌肽的分类 已发现的抗菌肽的种类繁多，即使亲缘关系十分接近的物种的同种抗菌肽，多肽序列也不尽相同，这反映了物种适应独特的微生物环境的特性。但二级结构有一定的相似性，都存在疏水氨基酸聚集区与带正电荷的氨基酸聚集区[8]。早期分类主要依据抗菌肽的，如植物抗菌肽、昆虫抗菌肽、两栖动物抗菌肽、鱼类抗菌肽、鸟类抗菌肽、哺乳动物抗菌肽等。但随着越来越多的抗菌肽被发现，多根据多肽的化学结构来分类。根据抗菌肽的氨基酸组成以及二级结构，可分为以下四类：（1）含两性分子α-螺旋的抗菌肽类；（2）有分子内二硫键的抗菌肽类；（3）富含脯氨酸的抗菌肽类；（4）富含甘氨酸的抗菌肽类。 （1）不含半胱氨酸含两性分子 α-螺旋的抗菌肽Cecropins是此类抗菌肽的代表。1980年，瑞典科学家Boman等从惜古比天蚕蛹中分离出抗菌肽cecropin，由31-39个氨基酸组成，其分子内不含半胱氨酸，不能形成分子内二硫键，但能形成两性的α-螺旋结构。Magainins也是一类具有两亲性α-螺旋的抗菌肽，是从非洲爪蟾皮肤中纯化出来的。 （2）含半胱氨酸有分子内二硫键的抗菌肽 此类抗菌肽又可称为defensins类抗菌肽，其特点是通过形成分子内二硫键使肽链形成反平行的β-片状结构，而稳定其空间结构。根据分子内半胱氨酸的位置和连接方式以及前体性质和表达位置的差异，防御素可分为α-防御素、β-防御素、θ-防御素三类。 （3）富含脯氨酸的抗菌肽类 富含脯氨酸的抗菌肽多发现于昆虫、哺乳动物中。昆虫纲目前已在双翅目、膜翅目、半翅目、鞘翅目中发现该类抗菌肽；哺乳动物中只发现于偶蹄动物。此类抗菌肽除富含脯氨酸和少量赖氨酸外，精氨酸含量也比较高（13~30%）。从昆虫中分离的富含脯氨酸的抗菌肽分为长链和短链两种。长链多肽在26~39个氨基酸残基之间，短链多肽在15~20个残基之间。 （4）富含甘氨酸的抗菌肽类 此类抗菌肽有些是全序中富含甘氨酸，如鞘翅肽（coleoptericin）；有些是某一结构域中富含甘氨酸（G结构域），如麻蝇毒素（sarcotoxinⅡ）、attacins等。此类抗菌肽中半胱氨酸含量很少或不含，不能形成分子内二硫键，且氨基酸残基上不具有修饰基团。 1.4抗菌肽的结构与理化特性 尽管抗菌肽的结构各异，但几乎所有的抗菌肽都有一定的相似性。它们通常是由12~50个氨基酸组成，N端富含赖氨酸、精氨酸、组氨酸等阳离子型氨基酸，C末端富含丙氨酸、缬氨酸、甘氨酸等非极性氨基酸，而中间部分则富含脯氨酸。因此，大多数抗菌肽是阳离子型的，通常带有2~7个正电荷，等电点大于7。另外，一些天然抗菌肽的C－末端往往呈酰胺化结构，这可能与其广谱抗菌的活性有关。 第二章抗菌肽活性检测平台的建立...............................................17 2.1前言.........................................................................................17 2.2材料与方法...........................................................................................17 2.3结果.......................................................................