蛹虫草废弃培养基中虫草素的分离提取和抑癌作用研究.pdfVIP

分类号 密级 学校代码 !Q5垒2 学号2Q!QQ21垒!垒窆Q 蛹虫草废弃培养基中虫草素的 分离提取及抑癌作用研究 Extractionof fromwasterice cordycepin of militarisandthe medium Cordyceps inhibitioneffectoncancercell 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二零一三年四月 摘要 虫草素(eordyeepin)是蛹虫草中主要活性成分，具有抗肿瘤、抗 菌抗病毒、免疫调节、清除自由基等多种药理作用。栽培过蛹虫草的 固体培养基中含有丰富的菌丝体，但这些固体培养基常做废料处理， 造成很大的浪费。本文利用大孔树脂柱层析法从蛹虫草[Cordyceps 素处理人肺癌A549细胞，研究其对肿瘤细胞的抑制作用，具体研究 结果如下： 1采用正交试验设计获得虫草素的最佳热水浸提条件，即浸提温 度70℃，浸提时间8h，料液比l：20(W／V)，对虫草素进行粗提。根 据5种大孔树脂对虫草素的吸附和解吸附能力对其进行了筛选，结果 表明XADl6树脂对虫草素静态吸附能力和解吸附能力最好，在pH9．0 的条件下，以50％的乙醇作为洗脱剂时其洗脱效果最好；利用聚酰胺 树脂精制虫草素，经由以上步骤提取的虫草素纯度达到了98％以上。 2将纯化后的虫草素作用于人肺癌A549细胞。利用MTT法检 测虫草素对细胞相对活力的影响；用Hochest33258荧光染色观察细 胞核形态的变化；检测不同处理组中细胞内caspases的活力。结果显 示，虫草素能有效抑制人肺癌A549细胞的活力，引起细胞核凝缩甚 至破碎，诱导其发生凋亡。 关键词：虫草素，蛹虫草废弃培养基，大孔树脂柱层析，抑制作用 ABSTRACT isthemainactivesubstanceof militaris，it Cordycepin Cordyceps hasbeenshownto activities possessmany pharmacologicalincluding regulation，free radicals wererichedinthesolidmediumsof scavengingetc．Mycelia militarisandconminedalotofactive thesolid Cordyceps substances，but in mediumswerediscardedthecultivation．Inthis were study,cordycepin withan resincolumn separatedoptimalmacroporous inhibitioneffectof ontumorcellA549were system，and