基因缺失疫苗.PPTVIP

伪 狂 犬 病（Pseudorabies, PR )  ( Aujeszky’s disease） 一、概 述 伪狂犬病是由PRV引起的家畜和多种野生动物的急性传染病。 牛、羊、猫、犬、许多野生动物、肉食动物及野生啮齿类等动物发病后通常具有发热、奇痒及脑脊髓炎等典型症状，均为致死性感染，但呈散发形式。 猪是PRV的贮存宿主和传染源。 人对PRV无易感性。 概 述 伪狂犬病病毒在全世界广泛分布。 早在1813年美国就有学者描述了该病。 直到1902年匈牙利微生物学家Aladar Aujeszky才第一次较为详细的描述了该病，并与狂犬病区分开来，并且提出该病是由一种病毒引起。 概 述 二十世纪前半叶以来，PR已成为东欧及巴尔干半岛如匈牙利、前捷克斯洛伐克、保加利亚、前南斯拉夫等国家养猪业的重要疾病。 大多数西欧国家和美国，1960年以前从猪群和牛群中分离到 PRV，对猪的感染极温和，对养猪业的经济损失不大。 六七十年代，毒力增强的毒株，导致爆发的次数显著增加，各年龄的猪均可发病。 二、病原体 *PRV属于疱疹病毒科α疱疹病毒亚科猪疱疹病毒I型。 *无囊膜的病毒颗粒直径约为110-150nm， *带囊膜的成熟病毒粒子的直径约180nm。 *衣壳壳粒的长度约12nm，宽9nm。其空心部份的直径约4nm。 *囊膜表面有呈放射状排列的纤突。 三、症状及病型 1. 妊娠母猪： 流产、 产死胎、 木乃伊胎， 其中以产死胎为主。 寒冷季节即冬末初春多发生。 母猪则表现为返情、屡配不孕。 2. 新生仔猪： 表现高热、 食欲废绝、 呼吸困难、 呕吐腹泻、 抑郁震颤、 神经症状， 昏迷以至衰竭死亡， 15日龄以内仔猪死亡率高达100%。 剖检主要是肾脏布满针尖样出血点、 有时见到肺水肿、 脑膜表面充血、出血。 3.断奶仔猪发病率20%-40%，死亡率10%-20%左右，主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等。 4.种猪不育症。 公猪感染伪狂犬病病毒后，公猪发生睾丸肿胀、萎缩等种用性能降低或丧失； 5.成年猪仅表现增重减慢等轻微温和症状。 四、流行病学特点 1．易感宿主：猪是贮存宿主，其他动物如牛、羊、猫、犬、兔、小鼠也可感染。 2．传播途径： （1）水平传播： 病毒主要通过已感染猪排毒而传给健康猪， 病毒污染的人员和器具。 通过鼻分泌物、乳汁和精液空气传播扩散。 （2）垂直 传播：怀孕母猪能发生垂直传播。 3、传染源 （1）流产胎儿、阴道分泌物和胎盘是病毒的主要传染源。 （2）野毒感染猪、弱毒疫苗免疫猪都会导致潜伏感染。在特定的自然条件的刺激或环境压力下，如贩运、分娩等可导致潜伏状态的病毒复活、扩散。 4、流行季节：具有一定的季节性，多发生在寒冷的季节，但其它季节也有发生。 五、诊断 1．病毒分离鉴定： *猪、牛、兔、犬、猫、猴、驹和雪貂的肾细胞 *牛的睾丸细胞， * 鸡胚成纤维细胞、 * 猪的PK-15、IBRS-2细胞, 猴的Vero细胞， * 仓鼠的BHK-21细胞。 2．ELISA 3．乳胶凝集试验 （LAT） 4．核酸杂交和PCR 5．中和试验法 (SNT) 6．微量琼脂扩散试验 （MIDT） 7．间接血细胞凝集试验 （IHA） 8．微量血凝和血凝抑制试验 乳胶凝集抗体检测试剂盒新兽药证书 伪狂犬病乳胶凝集抗体检测试剂盒获得国家级二类新兽药证书，1999年被农业部指定用作全国伪狂犬病普查。 鉴别诊断 伪狂犬病的鉴别诊断是在使用伪狂犬病的基因标志疫苗的前提下应用的一种诊断方法。 1 伪狂犬病毒gG基因的克隆与表达 2 伪狂犬病gG-乳胶凝集试验（gG-LAT） 鉴别诊断方法的建立 3 伪狂犬病gG-酶联免疫吸附试验（gG- ELISA）鉴别诊断方法的建立 伪狂犬病的基因标志疫苗—是在TK基因缺失的基础上，将病毒的非必需糖蛋白基因（gE和gG）进行缺失，得到的突变株就不能产生被缺失的糖蛋白，但又不影响病毒在细胞上的增殖与免疫原性。 将这种基因标志疫苗注射动物后，动物不能产生抗缺失蛋白的抗体。 因此，可通过血清学方法将自然感染野毒的血清学阳性猪与注苗猪区分开来。 伪狂犬病gG鉴别诊断试剂盒的安全证书 伪狂犬病gE鉴别诊断试剂盒的安全证书 六、综合防制 1、疫苗的免疫预防 (1)????? 灭活疫苗 猪伪狂犬病油乳剂灭活疫苗一类新兽药证书 TK-/gG-/LacZ+双基因缺失疫苗的研制 按常规方法制备鸡