宁夏枸杞全果对自然衰老小鼠认知及其脑组织中α7nAChR表达的影响.pdfVIP

宁夏枸杞全果对自然衰老小鼠认知及其 脑组织中a7nAChR表达的影响 孙伟1，苗珍花1。王亚娜1。秦瑕2。陈建茂1 (1宁夏医科大学，银川750014；2宁夏医科大学附属医院) 摘要：目的观察宁夏枸杞(FL)全果对自然衰老小鼠认知及脑组织中胡型神经烟碱胆碱能受体(ct7nAChR) 只3月龄ICR小鼠为青年对照组(青年组)。FLl组、FL2组分别用20％、10％FL汁灌胃，0．2ml／(10 g·d)，NS组 和青年组灌胃等量Ns，连续42d。用Morris水迷宫实验检测各组小鼠学习记忆能力；黄嘌呤氧化酶法测定其血清 超氧化物歧化酶(SOD)活性；硫代巴比妥酸法测定其血清丙二醛(MDA)水平；用免疫组化法检测其大脑组织中 鼠的学习记忆能力，其机制可能与FL的抗氧化和上调脑组织中ot7nAChR表达有关。 关键词：构杞；aT型神经烟碱胆碱能受体；自然衰老ICR小鼠；认知能力 中图分类号：R964 文献标志码：B 文章编号：1002-266X(2010)30-0031旬3 NS灌胃0．4ml／d，连续42d。 研究显示Ll2J，枸杞(FL)具有抗衰老作用，但具 体机制不明。2008—2009年，我们用宁夏FL全果汁1．4检测方法 对自然衰老ICR小鼠灌胃，观察其认知能力、血清 1．4．1 小鼠学习记忆能力检测 采用MWM实 SOD活性和MDA水平及脑组织中胡型神经烟碱胆验[31检测各组小鼠学习记忆能力(隐蔽平台搜索实 验和空间搜索实验)。 碱能受体(ct7nAChR)表达变化，探讨宁夏FL对自然 衰老ICR小鼠认知改善和抗衰老的作用机制。 1。4．2 小鼠血清SOD活性和MDA水平测定 1材料与方法 MWM实验结束后，各组小鼠断头处死取血。采用 1．1 主要试剂和仪器FL购于宁夏银川育新枸杞 黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分别检测其血清 种业有限公司。考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒、超氧 SOD活性和MDA水平，按试剂盒说明书操作。 化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)检测试剂盒(南1．4．3小鼠脑组织中ct7nAChR检测取脑皮质 京建成生物研究所)，722分光光度计(上海精密科组织和海马CA3区组织，用4％多聚甲醛固定，石蜡 学仪器有限公司)，兔抗人胡多克隆抗体(Santa包埋，5¨m厚连续切片。采用免疫组化sP染色，按 Cruz公司)，sP试剂盒(福州迈新生物工程有限公试剂盒说明书操作。用PBS替代一抗作空白对照。 司)。Morris水迷宫(MWM)和微机生物机能系统在高倍镜(×400)下，选取右侧颞叶皮质和海马 (成都泰盟科技有限公司)。 CA3区细胞膜和核膜完整、核仁清楚的细胞计数，每 1．2实验动物及分组ICR小鼠40只(15月龄30张切片计1个区域，每例标本取5张相邻切片，取其 只、3月龄10只)，购自宁夏医科大学实验动物中平均值作为计数结果。a7nAChR阳性颗粒呈棕褐 心。喂养于昼夜12h交替、室温(244-2)℃环境中。 色，主要分布在神经细胞膜、细胞质中。 将15月龄小鼠(自然衰老小鼠)随机分为NS对照1．5统计学方法采用SPSSll．5统计软件。数据 以x 组(Ns组)及FL高(FLl组)、低(FL2组)剂量组，4-s表示，组间比较采用t检验。P≤O．05为差 各10只；3月龄小鼠lO只为青年对照组(青年组)。异有统计学意义。 1．3 10 FL全果汁的制备及给药方法FLg加蒸 2结果 馏水50 2．1各组小鼠一般情况比较FL灌胃前，自然衰 ml，磨碎，即为20％FL全果汁，相当于生药 量0．2r,／ml。FLl组和FL2组分别用20％、10％FL老小鼠对外界刺激不敏感，行动迟缓。灌胃后4周 全果汁0．2ml／(10 时。FLl组、FL2组小鼠毛色白、有光泽，对外界刺激