口腔鳞状细胞癌组织p73与p53基因表达及意义.doc

　　口腔鳞状细胞癌组织p73与p53基因表达及意义 ：管宏伟 尚伟 杨学财 岳金 贾暮云 【摘要】 目的 探讨P73、P53蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及与肿瘤侵袭和转移的关系。方法 应用免疫组织化学通用型两步法检测50例口腔鳞状细胞癌病人的癌组织和癌旁正常组织中P73、P53蛋白表达。利用计算机图像分析得出平均吸光度（AOD）并进行统计学分析。结果 口腔鳞状细胞癌组织P73、P53蛋白的表达明显高于癌旁组织（u=2.798、2.913，Plt;0.01）。P73蛋白的表达与肿瘤T分期、肿瘤侵袭方式及区域淋巴结转移相关（r=0.288、0.327、0.374，Plt;0.05）；P53蛋白的表达与肿瘤病理分级、区域淋巴结转移相关（r=0.283、0.294，Plt;0.05）；口腔鳞状细胞癌组织中P73与P53蛋白的表达无明显相关性（r=0.172，Pgt;0.05）。结论 P73、P53可作为评估口腔鳞状细胞癌生物学行为和预后的独立指标。 【关键词】 癌,鳞状细胞；口腔；基因,p73；基因,p53 　　 ［ABSTRACT］Objective To study the relations betetastasis in oral squamous cell carcinoma （OSCC）. Methods The P73 and P53 a and non-carcinoma tissue that adjacent to carcinoma in 50 OSCC patients by immunohistochemistry method. The results age and average optical density （AOD） analyzed statistically. Results The expressions of P73 and P53 in OSCC ph node metastasis （r=0.288,0.327,0.374;Plt;0.05）.The expression of P53 ph node metastasis （r=0.283,0.294;Plt;0.05）. The expression of P73 had no obvious correlation eter in predicting the biological behavior and prognosis of OSCC. 　　［KEY outh; Gene, p53; Gene p73 p73基因作为p53基因家族的第一个成员，于1997年首先由KAGHAD等［1］发现。p73基因编码的P73蛋白，在结构和功能上均与P53蛋白具有很高的同源性［1,2］，且与肿瘤的发生密切相关。因此，p73作为候选的抑癌基因，受到广泛关注。本文应用免疫组织化学方法对口腔鳞状细胞癌组织和癌旁组织中P53和P73蛋白表达进行检测，探讨其在口腔鳞状细胞癌侵袭和转移过程中的意义。 　　1 材料和方法 　　1.1 病例选择 选择2005年1月～2007年12月在我院口腔颌面外科手术治疗的原发口腔鳞状细胞癌病人50例，男34例，女16例；年龄29～80岁，中位年龄62.5岁。其中舌癌24例，颊癌、牙龈癌、口底癌、腭癌、唇癌共26例。所有病例均行原发灶扩大切除及颈淋巴清扫术，手术标本均经石蜡固定、苏木精-伊红染色，常规病理检查。按照UICC 2002年标准进行TNM分期［3］，T1 期17例，T2期 20例，T3 期9例，T4 期4例；病理分级：高分化28例，中、低分化22例。有颈淋巴结转移者20例，无转移者30例。取其癌组织、癌旁正常组织（指肿瘤边缘外2.0 cm以上的黏膜组织）及颈清切除的颈淋巴结的石蜡标本进行研究。全部病例术前均未接受放疗或化疗。 　　1.2 主要试剂和仪器 鼠抗人P73和P53单克隆抗体（北京中杉金桥生物技术有限公司）；PV 6000二步法免疫组化检测试剂盒（Zymed公司，美国）；粘片剂APES（北京中杉金桥生物技术有限公司）；PBS磷酸缓冲液（浓度0.01 mmol/L，pH 7.2～7.4）；OLYMPUS显微镜（BH-2，日本）；Sample PCI图像分析软件（美国）。 　　1.3 免疫组织化学染色 存档的蜡块均经病理检查证实，用LEICA石蜡切片机做4 μm厚连续切片3张，1张作空白对照，2张行免疫组化染色。采用免疫组化通用型两步法染色，参照试剂盒说明书进行。用已知阳性切片做阳性对照，用缓冲液代替一抗做阴性对照。 　　1.4 结果判断及图像分析 以细胞核出现棕黄色颗粒作为P73、P53阳性细胞。对切片进行图像分析。将病理切片放在100倍的显微镜下，观察组织中各抗原