多重耐药肺炎克雷伯菌氨基糖苷类药物耐药相关基因研究.doc

　　多重耐药肺炎克雷伯菌氨基糖苷类药物耐药相关基因研究 ：戴学海，王华钧，金法祥，陈秋美 【摘要】 目的 ：了解多重耐药肺炎克雷伯菌氨基糖苷类修饰酶基因的存在状况。方法 ：自2006年1月至2006年10月住院病人标本中分离并筛选出20株多重耐药肺炎克雷伯菌，微量肉汤稀释法检测20种抗菌药物的敏感性;PCR法检测15种氨基糖苷类修饰酶基因。结果：20株多重耐药肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类药物庆大霉素、妥布霉素、奈替米星及阿米卡星耐药率分别为75%、80%、65%和60%，其中氨基糖苷类修饰酶aac(3)-Ⅱ基因阳性15株，aac(6’)-Ⅰb基因阳性1株，ant(3”)-Ⅰ基因阳性16株，aph(3’)-Ⅰ基因阳性3株，ant(2”)-Ⅰ基因阳性1株。结论：多重耐药肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类药物耐药的主要原因是aac(3)-Ⅱ、aac(6’)-Ib、ant(3”)-Ⅰ、aph(3’)-Ⅰ和ant(2”)-Ⅰ等5种氨基糖苷类修饰酶基因的存在;从肺炎克雷伯菌中检出aac(6’)-Ib-Cr型和aph(3’)-Ⅰ均为国内首次。 【关键词】 肺炎克雷伯菌;氨基糖苷类修饰酶;多重耐药性 　　Abstract: Objective: To understand the existence of genes encoding aminoglycoside modifying enzyme in multi-resistant Klebsiella pneumoniae. Methods: Samples of 20 strains of multi-resistant Klebsiella pneumoniae collected from the patients from January 2006 to October 2006 eans of broth induction inoglycoside modifying enzyme by erase chain reaction ulti-resistant Klebsiella pneumoniae to aminoglycoside，such as gentamicin，tobramycin，ilmicin and amikacin inoglycoside modifying enzyme aac (3’)-Ⅱ gene positive， 1 strain of aac (6’)-Ib，16 ones of ant (3”)-Ⅰ，3 ones of aph (3’)-Ⅰ and 1 strain of ant (2”) e time. Conculsion: The main reasons of multi-resistant Klebsiella pneumoniae resistance to aminoglycoside are the presence of aminoglycoside modifying enzymes called aac (3)-Ⅱ， aac (6”)-Ib， ant (3”)-Ⅰ， aph (3’)-Ⅰ and ant (2”)-Ⅰgenes. Genes of aac (6’)-Ib-Cr and aph (3’)-Ⅰ in Klebsiella pneumoniae are both first found and reported in China. 　　Key oniae;aminoglycoside modifying enzyme;multidrug resistance 　　肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae，KPN)已是 医院 感染的重要病原菌。近年尽管国内已有KPN菌的氨基糖苷类药物部分耐药相关基因研究报道[1-2]，但报道所涉及耐药相关基因较少。我们曾报道了一组老年患者KPN菌分离株β-内酰胺酶基因分型研究[3]，为进一步了解我院多重耐药KPN菌氨基糖苷类药物各种耐药相关基因存在状况，我们对20株分离自老年病房产β-内酰胺酶的KPN菌进行了15种氨基糖苷类修饰酶基因检测，现报告如下。 　　 1 材料和方法 　　1.1 菌株及鉴定 20株均为分离自2006年1月-2006年10月间我院老年病房患者(年龄61～90岁)临床标本，分别为：痰液13份，尿液6份，胆汁1份。全部菌株均使用ATB细菌鉴定仪鉴定菌种。 　　1.2 抗菌药物敏感性试验 药敏试验按美国CLSI 2006年版要求。质控菌株：大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603、铜绿假单胞菌ATCC27853购自卫生部临床检验中心，抗菌药物敏感试验采用微量肉汤稀释法。 　　1.3 细菌处理 挑纯培养菌落置入0.5 mL离心管内(内预置20