环氧合酶2和微血管密度与胃癌淋巴结转移及临床分期的关系.docVIP

　　环氧合酶2和微血管密度与胃癌淋巴结转移及临床分期的关系 【关键词】 COX2;微血管密度;胃癌;转移 Abstract：Objective To observe the associations of cyclooxygenase2 (COX2) and microvessel density (MVD) ph node metastasis and clinical staging in gastric cancer. Methods COX2 expression in gastric carcinoma cells or tissue ph node metastasis and TNM staging in gastric cancer ainly expressed in cytoplasm and could not be detected in gastric cancer cells of TNM stage I. The positive expression strength of COX2 ph node metastasis increased. The MVD value in cancer tissue obviously increased as the lymph node metastasis increased, ong the groups (Plt;0.01). Both COX2 expression and MVD value increased as the TNM stage progressed, ong the groups (Plt;0.01 or 0.05). Conclusion The COX2 expression and the MVD value are associated ph node metastasis and TNM stage in gastric carcinoma. 　　Key etastasis 　　肿瘤恶性生物学行为最为重要的是癌细胞的无限增殖和转移，而肿瘤血管形成又是癌细胞增殖和转移的基础，近来研究显示环氧合酶2(eyelooxygenase2，COX2)高表达可促进肿瘤的血管生成与转移，在肿瘤新生血管形成中起到重要作用。为此，我们分析70例胃癌患者癌组织中微血管密度(MVD)和COX2的情况，了解它们在胃癌临床分期、淋巴结转移及其它部位远处转移的的关系。 　 　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　选择本院2000-2008年胃肠外科手术 治疗 的胃癌标本70例，其中男44例，女26例;年龄18.5～75.6岁，平均(46.4±11.8)岁，手术方式包括根治性胃癌切除术52例，非根治性手术18例，患者术前均未进行过任何放疗或化疗。根据国际抗癌联盟(UICC)胃癌TNM分期进行临床分期：I期12例，Ⅱ期18例，Ⅲ期22例，Ⅳ期l8例。转移情况：无局部淋巴转移者15例，发生第1站淋巴结转移者18例，第2站淋巴结转移者20例，第3站淋巴结转移者12例，发生远处转移5例，其中肝转移2例、腹膜广泛转移2例和卵巢转移1例。 　　1.2 实验方法 　　COX2：采用ABC法免疫组化染色(试剂盒购自美国Vector公司)，组织切片经二甲苯脱蜡、酒精水化后，浸入3 mL/L的过氧化氢中30 min，以阻断内源性过氧化酶的活性，然后将玻片置入0.01 mol/L，pH 6.0的柠檬酸缓冲液中加热煮沸30 min，以充分暴露抗原，滴加兔抗人COX2多抗(北京中山生物技术公司)，4℃ 孵育过夜，再滴加二抗，室温下反应20 min，过氧化酶反应15 min，随后经二氨基联苯胺四盐酸盐显色5 min，再经苏木素复染，脱水、透明、封片。每次染色均以磷酸盐缓冲液代替一抗作为阴性对照。结果在细胞胞浆中出现棕黄色颗粒且着色明显高于背景或背景不着色而细胞着色者即为阳性细胞，每张切片根据阳性细胞染色强度及阳性细胞百分数的多少进行分级：染色强度(未着色、弱、中、强)及阳性细胞百分数(0%、1～25%、26～50%、gt;50%)，分别积分为0、1、2、3分，根据这2项指标和积分数之和分为4级，即2项分数之和为0分者，计为COX2表达阴性(-)，1～2分者为弱阳性(+)，3～4分者为阳性()，5～6分者为强阳性()，并根据TNM分期计算其平均分，即每组阳性积分总值除以每组例数。 　　胃癌病变组织微血管的计算：于40倍光镜下选取被CD34染成棕色的肿瘤微血管分布的最高区域，再在200倍视野下计数5个视野的微血管数目，取其平均值作为肿瘤组织的MVD值，只要它们和邻近的微血管、肿瘤细胞或其他结缔组织分开，就把它们作为一个微血管，但肌层较厚及