甘精胰岛素对糖尿病大鼠心肌纤维化及超微结构的影响.docVIP

　　甘精胰岛素对糖尿病大鼠心肌纤维化及超微结构的影响 ：金秀平，吴云丹，崔路坤 【摘要】 目的 探讨甘精胰岛素对糖尿病大鼠心肌的保护作用。方法 将雄性组)和胰岛素 治疗 组(DI组)，DI组给予甘精胰岛素经腹部皮下注射，治疗5周后称重并 计算 心脏体重比(H/B)；免疫组化法测定各组心肌转化生长因子β1(TGFβ1)、Ⅲ型胶原蛋白(collagen Ⅲ)的表达；透射电镜观察心肌超微结构。结果 ①与NC组比较,DM组和DI组的H/B、TGFβ1、collagen Ⅲ均明显增高(Plt;0.05)；与DM组比较，DI组的H/B、TGF β1、collagen Ⅲ均下降(Plt;0.05)。②心肌超微结构：DM组肌原纤维排列紊乱，线粒体增多，常有肿胀变性；而DI组病变轻微。结论 甘精胰岛素降低了心肌组织中TGFβ1及collagen Ⅲ的表达，延缓了糖尿病大鼠心肌纤维化的进程，改善了心肌超微结构。 【关键词】 甘精胰岛素；转化生长因子β1；Ⅲ型胶原蛋白；心肌超微结构；糖尿病 　　ABSTRACT: Objective To investigate the protective effect of insulin glargine in myocardium of diabetic rats. Methods Male ), diabetes ent group (DI). After 6 munohistochemical technique ate the expression of transforming groission electronic microscope. Results ① The levels of H/B and the expression of TGFβ1 and collagen Ⅲ of DM group and DI group yofibrils itochondria increased, yocardial ultrastructure ent ay partly suppress the increased expression of TGFβ1 and collagen Ⅲ in myocardial of diabetic rats, and it may decrease significantly the myocardial injury of diabetic rats. 　　KEY 组，13只)和胰岛素治疗组(DI组，10只)。两组大鼠血糖、体重无明显差异，具有可比性。DM组不给予治疗；DI组给予甘精胰岛素腹部皮下注射，并监测血糖，调整胰岛素用量，使大鼠血糖控制在7～8mmol/L左右,甘精胰岛素用量约为1.5U/(kg·d)，治疗5周。 　　1.3.2 标本制备 　　第6周末经尾静脉采血测血糖。大鼠称重后100g/L水合氯醛(300mg/kg)腹腔麻醉，取血检测血清甘油三酯(triglyceride, TG)、总胆固醇(total cholesterol, TC)、低密度脂蛋白(lom3 组织块，制成超薄切片置透射电镜下观察。 　　1.3.3 TGFβ1、collagenⅢ的检测 　　心肌切片常规脱蜡水化，酶抗原修复，滴加1∶100稀释的兔抗鼠TGFβ1、collagenⅢ多克隆抗体，4℃冰箱过夜，DAB显色，光镜下观察。在400倍光镜下，每张切片随机检测5个视野，计算平均积分吸光度(A)，以每组A值进行统计学分析。 　　2.2 血生化指标结果 　　与NC组相比，DM组血糖、H/B、TC、TG、LDLC明显升高，HDLC明显降低(Plt;0.05)。与DM组相比，DI组血糖、H/B、TC、TG、LDLC明显降低、HDLC明显升高(Plt;0.05)。与NC组相比，DI组H/B、TC、TG升高(Plt;0.05)，血糖、LDLC、HDLC差异无统计学意义(Pgt;0.05，表1)。表1 第6周末三组H/B、血糖、血脂、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白的变化（略） 　　2.3 免疫组化及图像分析半定量的结果 　　TGFβ1阳性表达呈棕黄色，位于胞质内。NC组心肌细胞胞质内可见少许阳性物质；DM组心肌细胞胞质内或血管周围可见阳性物质明显增多；DI组心肌细胞胞质内阳性物质较DM组明显减少。CollagenⅢ 阳性表达呈棕黄色，位于心肌细胞周围或小血管周围。NC组心肌细胞周围可见少许阳性物质；DM组心肌细胞周围或小血管周围可见大量阳性物质；DI组心肌细胞周围阳性物质较DM组明显减少。DM组TGFβ1 及collagenⅢ A值均明显高于NC组(Plt;0.05)。DI组TGFβ1及CollagenⅢ A值均低于DM组、高于NC组(Plt;0.0