直观比较法研究麦冬水煎液指纹图谱.doc

　　直观比较法研究麦冬水煎液指纹图谱 【关键词】 麦冬; 水煎煮液; 反相高效液相色谱; 指纹图谱; 直接比较法; 药物质量控制 　　Abstract:ObjectiveBecause of Radix ophiopogonis decoction used in various preparations of Chinese traditional medicine, the relevant fingerprint technology of Radix ophiopogonis decoction ethod atogram.After extracting the decoction atogram e chromatographic peak shapes became abnormal. ConclusionUsing aqueous solution of KH2PO4 as mobile phase of reverse phase liquid chromatography, of coordinate axis could observably improve the quality of fingerprint, such as logarithmic coordinate axis or axis break. 　　Key ethod; Control of drug quality 具有养阴生津和润肺清心功能的麦冬已被收入“儿康宁糖浆”“川贝雪梨膏”“心通口服液”“龙牡壮骨颗粒”和“补肾益脑片”等许多成方制剂， 在这些制剂的生产中均使用麦冬等药材的水煎煮液［1］。麦冬水煎液的指纹图谱研究是实现以指纹图谱技术控制这些药品质量的基础。鉴于人们对麦冬化学成分及其作用的研究结果，以高效液相色谱法制作麦冬水煎液的指纹图谱是非常适宜的方法。但是，水煎过程中药物所含的各种成分水解溶出，水煎液的组成相当复杂，其中某些物质可能会对测定产生干扰。如糖类，反相色谱柱对其几乎无分离能力，并引起很高的基线背景。色谱检测器对某些物质响应很高而对另外一些物质响应又很低，再伴以各种组分在药物中含量差异巨大，这些均会对指纹图谱的直接比较产生不利影响。有关物质的峰形及峰位是指纹图谱鉴别的重要依据，但有些物质的色谱峰形甚至会受到试样溶剂种类的显著影响。本文探索了有关技术问题的解决。 　　1 器材 液相色谱仪：岛津-高效液相色谱仪，CLASS-VP LC工作站。色谱柱：Agilent TC-C18 （4.6 mm×250 mm,5 μm）。 紫外检测器，检测波长254 nm。四川麦冬(燕京医药公司)，其它化学试剂均为分析纯。 　 　2 结果与讨论 　　2.1 麦冬水煎液的指纹图谱取麦冬10 g，加水40 ml, 回流煎煮3 h，滤除麦冬。滤液浓缩至15 ml，再经0.45 μm微孔滤膜过滤，即得供试液。麦冬水煎液的高效液相色谱图如图1所示。图1表明，麦冬水煎液的直接高效液相色谱分析会产生较高的色谱曲线背景。 　　2.2 麦冬水煎-乙醇提取液的指纹图谱取麦冬10 g，加水煎煮3 h，滤除麦冬。煎煮液浓缩至粘稠液体，用乙醇对粘稠物进行两次提取，每次用乙醇20 ml 。合并乙醇提取液，浓缩至15 ml，再经0.45 μm微孔滤膜过滤得供试液。图2为该供试液的高效液相色谱图。供试液中的溶剂为乙醇。糖类等在乙醇中的溶解度较低，图2的背景较图1的情况降低。但实验表明供试液以乙醇为溶剂时，有些色谱峰的峰形不够好，例如图2中10～20 min的色谱峰。 　　2.3 麦冬水煎-醇提-水溶液试样的图谱取麦冬10 g，加水煎煮3次，时间分别为3 h，2 h和2 h，滤除麦冬。合并煎煮液并浓缩至粘稠液体（放冷后呈固态）。在温热条件下用乙醇对粘稠物进行两次提取，每次用乙醇20 ml 。合并乙醇提取液，蒸除乙醇，加水15 ml溶解，滤除不容物，再经0.45 μm微孔滤膜过滤得供试液。图3为麦冬水煎-醇提-水溶液试样的色谱图。图3中的色谱峰较图1和图2多，应与煎煮次数（或时间）增加对应。《 中国 药典》中“二冬膏”“川贝雪梨膏”“补肾益脑片”等的制作中共煎煮7 h，图3印证了其必要性。 　　2.4 麦冬水煎液的稳定性将上述麦冬水煎-醇提-水溶液与麦冬水煎液比较，前者多一个乙醇提取过程，该过程旨在除去难溶于乙醇的糖类物质等。麦冬水煎-醇提-水溶液的稳定性亦可反映麦冬水煎液的稳定性。图4为麦冬水煎-醇提-水溶液在放置了1 d，2 d和6 d后分别测定的结果。图4表明色谱峰的变化不大。麦冬水煎液具有一定的稳定性。 　　2.5 讨论指纹图谱法鉴别中药的意义所在，已为许多所阐述［2，3］。就指纹图谱的色谱法鉴别（事实上主要应为高效液相色谱和气相色谱）而言，在一定意