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IL-32γ对LX-2细胞表达Ⅰ型胶原的影响.pdfVIP

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IL-32γ对LX-2细胞表达Ⅰ型胶原的影响.pdf

广东医学 2016年8月 第37卷第 15期 GuangdongMedicalJournalAug.2016,Vo1.37,No.15 ·2221· ij盛 出 千刍艺 IL一32^y对 LX一2细胞表达 I型胶原的影响 潘兴飞 ,张绍全 ,杨小安 ,邹小芳 ,魏立平 广州医科大学附属第三医院感染科 (广州510150); 中山大学附属第三医院感染科(广州 510630) 摘【要】 目的 研究IL一327可否诱导肝星状细胞LX一2表达I型胶原(CollagenI)。方法 不同浓度的 IL一327与 Lx一2共培养,分别收集培养上清液、提取细胞总RNA,real—timePCR检测CollagenImRNA表达水 平,ELISA法检测Collagen I蛋白质表达水平。用不同浓度 的人重组磷酸化 p38 蛋白(recombinanthumanactive p38a蛋白)与LX一2细胞共培养,48h后收集细胞培养上清液,ELISA法检测Collagen I蛋白质表达水平。再用 不同浓度的p38MAPK抑制剂SB203580加入L)(一2细胞与IL一327共培养的培养液中,分别收集培养上清液,采 用ELISA检测 Collagen I蛋白质表达水平,同时提取细胞总RNA采用real—timePCR检测 Collagen ImRNA表 达水平。结果 IL一327诱导人LX一2细胞表达CollagenI,且其表达水平随IL一327浓度的增加而增强;人重组 磷酸化p38a蛋白可诱导Lx一2细胞表达 Collagen I增高,阻断p38MAPK可降低 IL一327诱导的Collagen I表 达。结论 IL一327通过活化p38MAPK通路诱导Lx一2细胞表达CollagenI,IL一327,/可能通过诱导肝星状细胞 表达CollagenI而参与肝纤维化的形成。 【关键词】 白细胞介素一32;p38MAPK;LX一2细胞;I型胶原 TheeffectofIL一32,/onCollagen IexpressionbyLX一2cells. PAN艇 -fei,ZHANGShao—quan,YANG Xiao—an,ZOUXiao—fang,WEILi—ping. DepartmentofInfectiousDiseases, 3rdAffiliatedHospital,Guangzhou MedicalUniversity,Guangzhou510150,China Correspondingauthor:WeiLi—ping.E —mail:weilp8@hotmail.com A【bstract】 Objective ToinvestigatewhethercouldIL一327induceCollagenIexpressioninLX一2cells. Methods LX 一2cellswereco—culturedwithIL一327ofdifferentconcentrations.ThentotalRNA wasextracted,and thecellsupernatantwascollected.Collagen IRNA expressionlevelwasassayedbyusingreal—timePCR.Collagen I proteinexpressionlevelwasdetectedbyusingELISA.Subsequently,LX 一2cellswereco—culturedwithrecombinant HumanActivep38ctproteinofdifferentconcentrations.Forty—eighthourslater,thecellsupernatantwascollectedand Collagen Iproteinexpressionlevelwasassessed.TheLX一2cellswerethenco—culturedwithIL一327.andp38MAPK inhibitorsSB203580ofdifferentconcentrationswereadded.Collagen IRNAandproteinexpressionlevelswereassessed byusingreal—timePCRandELISA.respectively.Results IL~327couldin

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