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有效分离1kda小肽的tricinesdspage方法
24 1 CHINA BIOTECHNOLOGY 2004 1
1kDa TricineSDSPAGE *
**
曹佐武
( 510632)
为了建立能有效分离1kDa 的特小分子肽的TricineSDSPAGE 方法, 调整分离胶中聚丙烯
酰胺凝胶的分子组成, 使致密胶中丙烯酰胺 双丙烯酰胺的交联度为5%, 并加入 365% 的尿
素, 用于分离小至1kDa 的小分子肽, 并与常规的SDSPAGE 先前报道的TricineSDSPAGE 相比
较结果改进的致密胶可以有效分离分子量小至1kDa 的小肽, 明显优于常规的SDSPAGE 现
有的TricineSDSPAGE 方法
聚丙烯酰胺凝胶电泳 小分子肽
,
1
,
, 11
( promega ) , ( E. Merck,
( SDSPAGE) Darmstadt) , ( AP) ( Sigma, USA ) , TEMED
, (Sigma,USA) , ( Sigma) ,
SDS SDS , (Sigma) , (Tricine) ( Serva) , Tris
( Serva) , SDS( Amresco)
, SDSPAGE 15 (
~ 200kDa , ) , C6210( Sigma) ,
Tris ( Sigma)
10kDa ( BioRad Lab, USA) , Mini
protein ( BioRad Lab, USA) ,
[1]
(Tricine)SDSPAGE , ( BioRad)
1~ 100kDa , 12
, 121 TricineSDSPAGE 蛋白质电泳溶液准备
( 1) ( 10 ) 12114g Tris
, 400ml , 10molL HCl pH 9,
[2]
2kDa , 1kDa 500ml
, ( 2) ( 10 ) 6055g Tris, 95 g
, 1kDa Tricine 5g SDS 400ml ,
500ml
(3) ( 3 ) 1 15g Tris, 15g
SDS 400ml , 1molL HCl
:: pH 45, 500ml
* ( No. 122 丙烯酰胺储存液配制
(No. 0103
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