rhG-CSF对缺氧SH-SY5Y细胞及大鼠缺血脑组织中LAMP-2a和HSC-70蛋白表达的影响.pdfVIP

JournalofZhengzhouUniversity(MedicalSciences) JuL 2013 Vo1．48 No．4 · 481 · doi：iO．3969／j．issn．1671—6825．2013．04．013 rhG—CSF对缺氧 SH—SY5Y细胞及大 鼠缺血脑组织 中LAMP- 2a和 HSC-70蛋 白表达的影响 田 婧，王雪晶，马耀华，荆 婧，邓文静，苏 楠，滕军放 郑州大学第一附属医院神经 内科 郑州 450052 ‘ #通讯作者 ，男，1960年 11月生 ，硕士，主任医师 ，研究方 向：脑血管病基础与临床 ，E—mail：tjf．6666@yahoo．com．an 关键词 重组人粒细胞集落刺激 因子 ；分子伴侣介导 自噬；脑缺血 ；SH—SY5Y细胞 ；大鼠 中图分类号 R743．3 摘要 目的：观察重组人粒细胞集落刺激因子 (rhG—CSF)对缺氧人神经母细胞瘤 SH—SY5Y细胞及大鼠缺血脑 组织 中分子伴侣介导 自噬 (CMA)的标志性蛋 白LAMP一2a及 HSC一70表达 的影响，探讨 rhG—CSF抑制缺血缺氧后神 经元损伤的机制 。方法 ：制备 SH—SY5Y细胞缺氧模型，分别给予0、100、200Ixg／L的rhG—CSF孵育48h，Westernblot 检测各组细胞 LAMP一2a及 HSC一70的表达。将 54只SD大鼠随机分为3组，每组 18只；假手术组仅行颈部手术不 栓塞大脑中动脉 ，模型组及实验组制备大脑 中动脉栓塞模型，实验组给予 rhG—CSF(50x／g·kg～ ·dI1)注射 5d，假 手术组及模型组给予等量生理盐水 。Westernblot检测脑缺血周边 区组织 LAMP一2a及 HSC-70的表达 。参照改 良 神经功能缺损评分对 3组大 鼠进行神经功能评价 。结果：随rhG—CSF浓度 的增加 ，缺氧 SH．SY5Y细胞 HSC-70及 LAMP一2a的表达逐渐升高(F=31．574、3．943，P0．001)。3组大 鼠HSC-70及 LAMP一2a的表达水平差异有统计学 意义 (F：503．658、859．985，P0．001)，且实验组及模型组大 鼠HSC．70、LAMP-2a的表达水平高于假手术组，实验 组高于模型组 (P0．05)。实验组大 鼠神经功能改善程度优于模型组 (t=6．322，P0．001)。结论 ：脑缺血 中rhG— CSF可能通过上调 CMA发挥神经元保护作用 。 EffectsofrhG--CSF on expressionsofLAMP--2aandHSC—-70 inhypoxia SH—SY5Y cellsandbraintissueofhopoxia—ischemiarats TIANJing。WANGXuejing。MAYaohua，】lNGJing，DENGWenjing，SUNan，TENGJunfang DepartmentofNeurology，theFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052 Keywords recombinanthumangranulocytecolonystimulatingfactor；chaperone—mediatedautophagy；cerebralische— mia；SH-SY5Y cell；rat Abstract Aim：Toobservetheeffectsofrecombinanthumangranulocytecolonystimulatingfactor(rhG—CSF)onex· pressionsofLAMP一2aandHSC一70 inhypoxiaSH—SY5Y cellsandhopoxia—ischemiaratssoastofurtherdiscusstheprotec- tionmechanism ofrhG—CSF．Methods：SH—SY5Y cellhypoxiamodelwaspreparedandcellswereculturedwithrhG—CSFat 0，100，200 g／Lfor