saRNA上调人前列腺癌PC-3细胞中Numb基因表达的研究.pdfVIP

重庆医学 2016年 2月第45卷第4期 439 · 论 著 · doi：10．3969／j．issn．1671—8348．2016．04．003 saRNA上调人前列腺癌 PC一3细胞中Numb基因表达的研究 陈金飚 ，颜醒愚△ (福建 医科大学附属第二 医院泌尿外科 ，福建泉州 362000) [摘要] 目的 基于小激活RNA(saRNA)的肿瘤治疗策略 ，筛选具有激活Numb基因功能并相对高效的saRNA分子。方 法 设计与合成针对 Numb基 因的3对候选小分子双链 RNA(dsRNA)分子 ，对照组 dsRNA(dsContro1)设计成与人类基 因组序 列非 同源。将 dsRNA分子转染人前列腺癌细胞(PC-3细胞)。采用 RT-qPCR法检测转染后 PC-3细胞 中靶基 因Numb的mR— NA表达水平。Westernblot验证转染后PC一3细胞靶基因Numb的蛋 白表达水平。结果 dsNumb-870、dsNumb一948均未能上 调 PC-3细胞 中靶基 因NumbmRNA 和蛋 白水平 ；而 dsNumb一298能上调细胞 内NumbmRNA和蛋 白水平 。结论 dsNumb一298 具有特异性激活 PC一3细胞 中Numb基 因表达 的功能。 ． [关键词] 小激活RNA；Numb；人前列腺癌PC-3细胞 [中图分类号] R737．25 [文献标识码] A [文章编号] 1671—8348(2016)04—0439—03 Studyon saRNA supregulation ofNumbgeneexpression inhumanprostatecarcinomaPC一3cells ChenJinbiao，YanXingyu (DepartmentofUrology，theSecondAffiliatedHospital，FujianMedicalUniversity，Quanzhou，Fujian362000，China) [Abstract] Objective ToscreentherelativelyhighefficiencysmallactivatingRNA (saRNA)moleculepossessingactivating thetargetgeneNumbbasedonthetumortreatmentstrategyofsaRNA．Methods Threepairsofcandidatesmalldouble—stranded RNA (dsRNA)moleculesweredesignedandsynthesizedfortargetgeneNumb，andthedsRNA inthecontrolgroup(dsContro1) wasdesignedtobenon-homologouswiththehumangenomesequence．ThedsRNA moleculesweretransfectedintoprostatecarci— nomaPC一3ceils．Thereal-timequantitativePCR (RT-qPCR)wasemployed to detectthemRNA expression levelsofthetarget geneNumbinPC-3cellsaftertransfection．ThenW esternblotwasusedtoverifytheproteinexpressionlevelsofthetargetgene NumbinPC-3cellsaftertransfectingthesaRNA intothecells．Results dsNumb一870anddsNumb=948failedtoup—regulateboth themRNA andproteinexpressionlevelsofthetargetgeneNumbinhumanprostatecarcinomaPC一3cei