siRNA干扰CXCR4基因对T24细胞侵袭力的影响.pdfVIP

JournalofZhengzhouUniversity(MedicalSciences) Sep． 20 o1：47 ： · 667 · doi：10．3969／j．issn．1671—6825．2012．05．023 siRNA干扰 CXCR4基 因对 T24细胞侵袭力的影响 郑湘予¨，庞 霞¨，李晟磊¨，朱志强 1)郑州大学第一附属医院病理科 郑州 450052 2)郑州大学第一附属医院急诊科 郑州 450052 #通讯作者 ，男，1972年5月生 ，博士，副主任医师，研究方向：急诊外科 ，E—mail：zdzhuzhiqiang@126．COB 关键词 膀胱移行细胞癌 ；RNA干扰 ；T24细胞 ；CXCR4；侵袭 中图分类号 R737．1 摘要 目的：研究 RNA干扰下调 CXCR4基因对膀胱移行细胞癌 T24细胞体外侵袭力的影响。方法 ：根据 CX— CR4基 因特点，设计合成 CXCR4特异性小干扰 RNA(siRNA)，并转染 T24细胞 ，同时设置空 白对 照 (转染时只加脂 质体)和阴性对照(采用无关序列 RNA转染 )组 。通过 RT—PCR方法检测 CXCR4mRNA 的表达 ，采用 Westernblot 方法检测 CXCR4蛋 白的表达 ，用 Boyden小室体外细胞侵袭模型检测细胞体外侵袭能力 。结果：各组 T24细胞 的 CXCR4mRNA、蛋 白水平和穿膜细胞数 比较 ，差异有统计学意义 (F=140．822、473．079和 133．247，P0．001)。 siRNA转染组 T24细胞的CXCR4mRNA、蛋 白表达下调 ，体外侵袭力减弱 (P0．05)。结论 ：CXCR4特异性 siRNA 可降低膀胱移行细胞癌 T24细胞体外侵袭力 。 EffectsofCXCR4 genesilencingbysmallinterferingRNA oninvasive— nessofbladdercancerT24cells ZHENGXiangyu¨ PANG Xia ，LIShenglei¨ ZHU Zhiqiang2) ， ， )DepartmentofPathology，theFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052 2)De— partmentofEmergency，theFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052 Keywords bladdertransitiona1cellcarcinoma；RNA interference；T24cell；CXCR4；invasiveness Abstract Aim ：ToinvestigatetheeffectsofCXCR4 genesilencingbysmallinterferingRNA oninvasivenessofblad— dercancerT24cells．Methods：UsingLipofectamine 2000，CXCR4siRNAwastransfectedintoT24cellsinvitro(siRNA transfectgroup)．Blankcontrolgroupandnegativecontrolgroupwereestablished．RT—PCRwasusedtodetecttheexpres— sion ofCXCR4 mRNA in T24cells．W esterm blotwasused todetecttheexpression ofCXCR4 protein．Boyden chamber experimentwasusedtocountthemembrane—permeablecells．Results：ThelevelsofCXCR4mRNAandproteinexpression， andthenumberofmembrane—permeablecellsamongthe3groupshadsignificantdifferences(F=140．822，473．079， 133．247，P0．001)，w