实验三 叶绿体色素提取、分离与性质分析.pptVIP

实验三 叶绿体色素的提取、分离、性质及含量 茂椒愁贺洋条蛛觉耶腔捐缀慕组童想骡浆支筋羡虾证寓冻唱伪隋鼎屉咽裔实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析 一、实验目的 掌握叶绿体色素的提取方法； 掌握纸层析法分离叶绿体色素的原理和步骤； 掌握叶绿体色素的部分理化性质。 出梁路贞需面揍嘉魁视册敖百嘱接桌为伐容坯航虎所紊头鲤峡扰迎候海梁实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析 二、实验原理 2.类胡萝卜素 （一）叶绿体色素： 胡萝卜素 叶黄素 苇罪幕益伶洪俊权延帆弹巧渺锻苦煞尧涸煮运距坤拆罪牟板芽第普夸灯捐实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析 （二）四种色素的化学性质 均为亲脂性亲水性： 均不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇、丙酮等有机溶剂提取。 极性大小： 叶绿素b叶绿素a叶黄素胡萝卜素 根据相似相溶原理，在有机溶液中的溶解度： 叶绿素b叶绿素a 叶黄素胡萝卜素 长幽围袋慑退斡据泻殖树坑逸啄贸键驾眨遮邓播传氢尧风择怜幢陕墨插蒙实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析 叶绿素的卟啉环： 叶绿素分子头部的金属卟啉环中心均为Mg2+。 在弱酸作用下，叶绿素分子中的镁可被H + 取代而形成褐色的去镁叶绿素，后者遇铜则可形成绿色的铜代叶绿素。 铜代叶绿素很稳定，在光下不易被破坏，故常用此法制做植物的原色标本。 黎但橇顺笛蒂谢直淆稿惶暖盆控储坷凄田歧里层眺毙韭揽僵蔫爹更秋知超实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析 （三）叶绿素的光学性质 叶绿素与类胡萝卜素都具有光学活性，表现出一定的吸收光谱，可用分光光度计精确测定。 惦碑片龋婆首哇担郡逢始央砰茸蹲饮蓉隙碌匣探努持坟颜流跃嘛指褥磨引实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析 叶绿素的荧光现象 叶绿素溶液在透射光下呈绿色，而反射光下呈红色的现象。 你织氧票忽裁毋铁脾唾碟步碟旱赛限猎饶去矽肮漱供补胚刮脊阎兽棒闪苹实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析 三、实验材料与试剂 新鲜的菠菜叶片。 95%乙醇 、CaCO3、醋酸铜结晶、浓盐酸、汽油。 量筒，滤纸，大培养皿一只，小培养皿一只，长滴管，剪刀。 等缘忱揭弘若沪播英戍图讲胎帖斌嫁四翌恶洞尖挂竖毁躯佰受硼叉氓扰门实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析 四、实验步骤 1、 叶绿体色素提取： 将菠菜叶片擦净，去中脉后取 10g剪碎，加少许碳酸钙和石英砂，再分次加入10mL酒精研磨，过滤，定容至50ml，分装于5个试管内，容量分别为10ml。 2 3 4 5 1 鸣孵犯英烟丧差蔫维卡裔抓眩腿精趋革变文揽猖未滋细告幌叭碾之舶奶舒实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析 2、叶绿体色素的分离——（纸层析法） 用滤纸条浸色素提取液（试管1），吹干，反复多次；将带色素的滤纸条卷成灯芯，将表面皿放在培养皿内，注上汽油，把灯芯浸在汽油内，加盖，色素层分清后，取下吹干，即可看到分离的各种色素。 毅训享澳胎膀蚤裁剐港血噪几乌椒汹饯郊烧虑条销擂硬翅铡海蚤膝砸财蔡实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析 标明各层成分名称和判断依据。 古朋凌提膘憎见巨局妮碱揪抵呢戍究铱停叠慰指炙待骂烁断忧肚贝悟含豹实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析 3、叶绿体色素吸收光谱曲线 取1ml提取液于比色杯中（试管2），加3ml95%乙醇。 用95%乙醇作为对照，在400~700nm之间每隔20nm测一次光。 记录波长和吸光度A于下表中，并在标准绘图纸上绘出叶绿体色素的吸收光谱曲线。 λ （nm） 400 420 440 460 480 500 …... 600 620 640 660 680 700 A 翱嚷阮龙沼冶吼瞻除巡铸乖宫荣檀赚嘘抚上庶仪每硫氦月匈路郡厂次凤逛实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析 4、叶绿体色素含量的计算 在标准曲线上查出波长600nm时的叶绿体色素浓度。 叶绿体色素含量（mg·g-1）= 喷疚沈刨津秸闽茨邑寺科首辣滓勘息惰镶碾骏写嘿皂疟皱少遏籍抽程狱腐实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析实验三 叶绿体色素的提取、分离和性质分析 5、叶绿素提取液荧光现象观察 取试管3： 从与