第四节 氮的同化.docVIP

一、植物的氮源 　　自然界中N素循环 　　空气中含有近79%的氮气(N2),然而,植物无法直接利用这些分子态氮。只有某些微生物(包括与高等植物共生的固氮微生物)才能利用大气中的氮气，而植物所利用的氮源,主要来自土壤。土壤中的有机含氮化合物主要来源于动物、植物和微生物躯体的腐烂分解,然而这些含氮化合物的大多是不溶性的,通常不能直接为植物所利用，植物只可以吸收其中的氨基酸、酰胺和尿素等水溶性的有机氮化物。尿素虽是植物良好的氮源,但由于它易被分解为NH3和CO2,所以施入田间的尿素,也只有一部分是以尿素分子的形式被植物吸收的。植物的氮源主要是无机氮化物,而无机氮化物中又以铵盐和硝酸盐为主,它们约占土壤含氮量的1-2%。植物从土壤中吸收铵盐后,可直接利用它去合成氨基酸。如果吸收硝酸盐,则必须经过代谢还原(metabolic reduction)才能被利用,因为蛋白质的氮呈高度还原态,而硝酸盐的氮则呈高度氧化态。   二、硝酸盐的还原 　　大多数植物虽能吸收NH+4,但在一般田间条件下,NO-3是植物吸收的主要形式。NO-3进入细胞后,就被硝酸还原酶和亚硝酸还原酶还原成铵。在此还原过程中,每形成一个分子NH+4要求供给8个电子。硝酸盐还原(nitrate reduction)的过程如下:   　　植物细胞硝酸盐同化，包括硝酸盐的跨质膜运输，然后经两步还原为氨 　　 硝酸还原酶(nitrate reductase, NR)催化硝酸盐还原为亚硝酸盐。真核生物的NR由于来源不同,其亚基组成的数目和大小也不同,小的有2个亚基,大的可达8个亚基。现在认为硝酸还原酶是一种可溶性的钼黄素蛋白(molybdoflavoprotein),它由黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD),细胞色素b557和钼复合体(Mo－Co)组成，分子量200 000～500 000。推测它的结构为同型二聚体(homodimer)(图3-18)。硝酸盐还原所需的供氢体是NADH(NADPH)。NO3-还原为NO2-的反应如下：   　　图3-18 高等植物硝酸还原酶的模型 　　A)硝酸盐还原酶的结构域结构。一个NR单体有三个主要的结构域，分别与钼辅因子、血红素和FAD相连。FAD连接区从NAD（P）H接受电子；血红素结构域运送电子到MoCo连接区，它传递电子给硝酸盐，hⅠ和hⅡ指铰链1和铰链2，分离功能结构域。(B)硝酸盐还原酶的条带图解。血红素辅基用紫色表示，FAD用蓝色表示，MoCo用黑色表示，2个单体之间的界面用黄色表示 　　 硝酸还原酶是一种诱导酶(induced enzyme)。我国科学家吴相钰、汤佩松(1957)首先发现水稻幼苗若培养在含硝酸盐的溶液中就会诱导幼苗产生硝酸还原酶,如用不含硝酸盐的溶液培养,则无此酶出现。这也是国内外最早的有关高等植物体内存在诱导酶的报道。亚硝酸还原酶(nitrite reductase,NiR)催化亚硝酸盐还原为铵。在正常有氧条件下,由NR催化形成的亚硝酸盐,很少在植物体内积累,因为在植物组织中NiR的存在量大。亚硝酸还原酶分子量为61 000～70 000,它由两个亚基组成,其辅基由西罗血红素(sirohaem)和一个4Fe－4S簇组成。西罗血红素的作用是使6个电子转移到底物亚硝酸上,其反应如式3-10和图3-19所示:   　　图3-19亚硝酸还原的电子传递体系 　　Fdred和Fdox分别是还原态和氧化态的铁氧还蛋白 　　 硝酸盐的还原可在根和叶内进行,通常绿色组织中硝酸盐的还原比非绿色组织中更为活跃。硝酸在叶内和根中的还原过程见图3-20和图3-21。  　　图3-20在叶中的硝酸还原 　　DT.双羧酸运转器； FNR.FdNADP还原酶； MDH:苹果酸脱氢酶；FRS.Fd还原系统  　　图3-21在根中的硝酸还原 　　NT.硝酸运转器 在绿叶中硝酸盐的还原是在细胞质中进行的,当硝酸盐被细胞吸收后,细胞质中的硝酸还原酶就利用NADH供氢体将硝酸还原为亚硝酸,而NADH是叶绿体中生成的苹果酸经双羧酸运转器,运送到细胞质,再由苹果酸脱氢酶催化生成的。NO-3还原形成NO-2后被运到叶绿体, 叶绿体内存在的NiR利用光合链提供的还原型Fd作电子供体将NO-2还原为NH+4。硝酸盐在根中的还原与叶中基本相同,即硝酸盐通过硝酸运转器进入细胞质,被NR还原为NO-2,但电子供体NADH来源于糖酵解。形成的NO-2再在前质体被NiR还原为NH+4。长期以来对根中存在的NiR的电子供体不清楚，但最近已从许多植物根中发现了类似Fd的非血红素铁蛋白或Fd-NADP还原酶。 　　硝酸盐在根部及叶内还原所占的比例受多种因素影响,包括硝酸盐供应水平、植物种类、植物年龄等。一般说来,外部供应硝酸盐