分子生物学课程教学大纲-广东海洋大学.doc

附件2： 分子生物学实验技术 教学大纲 （研究生） 广东海洋大学实验教学部 2011年5月 0109《分子生物学实验技术》课程教学大纲 一、课程概况 课程中文名称 分子生物学实验技术 课程英文名称 Experiment Of Molecular Biology 课程编号 0109 课程类别 □公共必修课 □公选课 □院级限选课 √学科基础课 □专业基础课 □专业限选课 □专业任选课 总学时 36 讲授学时 实验学时 36 总学分 2 开课单位 实验教学部 开课系所 研究生 授课对象 水产、食品和农学等 先修课程 《有机化学》、《生物化学》 执笔人 刘铀 审核人 刘海 审批人 杨捷 修订时间 2011年5月 课 程 简 介 基因组计划、蛋白质组计划、基因重组技术代表了当今生命科学的前沿领域，是揭示生命规律的重要手段。为生物类各专业的研究生开设分子生物学实验技术，使其掌握基因克隆、基因重组、基因表达与检测技术的原理和操作技术对于开阔视野、提高创新能力是十分必要的。 课 程 大 纲 一、课程的性质与任务：近年来分子生物学在医药卫生、农业、环保、轻工等领域有突飞猛进的发展，分子生物学实验技术已成为生命科学及相关学科院系教学科研不可缺少的一部分。本课程每个实验都要求学生动手进行独立操作，要求学生掌握基础的分子生物学实验技术，提高学生在分子生物学技术方面的动手能力，为专业课程的学习及参加科研实践打下基础。 二、课程的目的与基本要求：熟练掌握操作如基因克隆、基因重组、基因表达以及表达产物检测）的基本原理专业。 动物生物化学、微生物学、遗传学、细胞生物学等。 《分子生物学》与生物科学中前继课程有着紧密的联系，内容存在一定交叉，但对课程的要求和侧重点均有所不同。学习本课程前，要求学生了解生物化学、细胞生物学、微生物学等课程的和实验技能序号 实验名称 学时 实验类别 1 碱裂解法制备质粒DNA 3 操作型 2 感受态细胞的制备 3 操作型 3 质粒DNA酶切与凝胶纯化 3 操作型 4 PCR技术扩增目的基因 3 操作型 5 目的基因与载体的体外连接与转化 3 操作型 6 转化子的筛选 3 操作型 7 重组质粒的酶切鉴定 操作型 8 目的基因的诱导表达与检测 综合型 9 Western-Blot检测目的蛋白 设计型 10 RT-PCR技术从不同组织材料中扩增目的基因 研究创型新 碱裂解法制备质粒DNA质粒DNA制备质粒DNA碱裂解法制备质粒DNA质粒DNA质粒DNA感受态细胞的制备制备习用CaCl2处理法制备大肠杆菌感受态细胞，延伸了解酵母及哺乳动物感受态细胞的制备方法。 备的大肠杆菌感受态细胞转化效率高于106，无其它细菌污染。质粒DNA酶切与凝胶纯化学会用限制酶切的方法线性化质粒DNA线性化质粒DN线性化质粒DNPCR技术扩增目的基因学会使用生物软件设计引物熟练掌握PCR技术的原理、方法、操作及注意事项学会根据PCR产物分析、调整扩增反应条件[实验内容]利用DNAstar（4.0）用PCR方法扩增目的基因并用琼脂糖电泳检测扩增效果。 实验要求目的基因与载体的体外连接与转化转化子的筛选了解转化子的筛选方法，掌握用PCR方法筛选重组克隆从LA抗性平皿上挑取单菌落培养，以菌液为模板，用PCR扩增筛选重组菌重组质粒的酶切鉴定目的基因的诱导表达与检测学会用SDS检测表达产物。 IPTG诱导不同时间，以SDSWestern-Blot检测目的蛋白RT-PCR技术从不同组织材料中扩增目的基因八、教材与参考书： 教材编. 分子生物学参考书本课程的考核方式：。 执笔: 刘铀审核:批准人:时间: 5 GDOU-B-11-213