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细胞核分离和纯化和RNA、DNA定量测定-20121201
;1. 了解细胞核分离纯化的基本原理和方法
2. 掌握DNA、RNA定量测定的原理及方法
3. 掌握离心机的使用 ;一、细胞核的分离与纯化（上午）
二、RNA的定量测定
三、DNA的定量测定 ;一、细胞核的分离与纯化; DNA、RNA在细胞中的分布：;核 酸 ;浓HCl; DNA;1、0.25mol/L蔗糖柠檬酸（含3.3 mmol/L CaCl2） 称取蔗糖86g及CaCl2363mg，用1.5％拧檬酸液溶解并稀释至1000ml。
2、0.88mol/L蔗糖柠檬酸液（含3.3mmol/LCaCl2） 称取蔗糖301g及CaCl2363mg，用1.5％柠檬酸液溶解并稀释至1000ml。
3、核洗液：即0.05mol/L，Tris—HCl（pH7.5）－0.15mol/L NaCl液。
在0.2mol/L Tris—HCl pH7.5缓冲液250ml中加NaCl8.7g再用蒸馏水稀释至1000ml。
4、 1.5％拧檬酸 5、0.9％NaCl 6、0.02N NaOH
7、离心机 8、水浴箱 9、常规玻璃仪器;用颈椎脱臼法杀死小白鼠后，迅速剖开腹部取出肝脏，除去结???组织，尽快置于盛有0.9%NaCl的小烧杯中，反复洗涤，尽量除去血液。洗完后将肝脏一分为二，每个小组半个肝，直接将半个肝放在小烧杯里剪碎，剪碎的肝脏放入匀浆器中，加入 1.5％柠檬酸钠溶液4.5ml，反复研磨制成匀浆，从而破碎细胞。研磨完后，将匀浆液用单层纱布进行过滤，以除去未研碎的组织。
;（2）分离细胞质和细胞核;半个肝脏＋1.5%柠檬酸溶液4.5ml，制成匀浆;试剂（ml）;试剂（ml）;表1. RNA的定量结果;酸性溶液，取用要小心。
混匀要充分，并且要注意安全，防止液体溢出。
沸水浴操作时，要注意自己和别人的安全。
离心完后，一定先将上清液转出到另一试管，再吸取所需量的水解液。;3. 除了定糖法来测定DNA和RNA的含量，还有已经学习过的哪种方法也可以用来测定DNA和RNA的含量？;
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