反相高效液相色谱法测定野生四叶参中氨基酸.pdfVIP

Journal 0f Zhengzhou University(Medical ! !) ： !： ： · 101· 反相高效液相色谱法测定野生四叶参中氨基酸 刘利娥 ， 常爱武 韩 萍 刘金盾 张洪权 1)郑州大学公共卫生学院郑州 450001 2)郑州大学化学工程学院 郑州 450001 3)郑州大学医学实验中心 郑州 450052 #通讯作者，男，51岁，教授，研究方向：天然产物分析 关键词 柱前衍生；反相高效液相色谱法；四叶参；氨基酸 中图分类号 0657．72；Q949．95 摘要 目的：建立测定野生四叶参中氨基酸含量的反相高效液相色谱法(RP—HPLC)。方法：用盐酸水解大别 山区野生四叶参中的蛋白质。采用反相高效液相色谱法，色谱条件为：色谱柱：Hypersil ODS—BP C18柱(4．6 mm× 250 mm，5“m)；流动相A：醋酸．醋酸钠缓冲液(pH=7．2)；流动相 B：甲醇，流速1．0 mL／min，流动相采用梯度洗脱 方式，荧光检测波长为450 nm。分析四叶参中各种氨基酸含量。采用外标法定量。结果：氨基酸在25．0～800，0 I~mol／L范围内浓度与色谱峰面积有良好的线性关系(r≥0．993)，该方法的回收率在 89．5％ ～109．2％，RSD在 3．2％～9．0％，检测限在 1，0～3．7 p~mol／L。野生四叶参中含有12种氨基酸，总氨基酸含量为51．49 mg／g，必需氨 基酸含量为6．95 mg／g。结论：建立的分析方法精密度好、准确度高，适用于野生四叶参中氨基酸含量的分析。 Determination of amino acids in Wild Codonopis Lanceolata by RP—HPLC LIU Li e · ，CHANG Ai WU ，HAN Ping ，LIU Jindun ，ZHANG Hongquan ’ )College of Public Health，Zhengzhou University，Zhengzhou 450001 2)College of Chemical Engineer- ing，Zhengzhou University，Zhengzhou 450001 3)Center ofMedical Experiment，Zhengzhou University， Zhengzhou 450052 Key words pre—column residue derivation；RP—HPLC；Wild Codonopis Lanceolata；amino acid Abstract Aim：To determine the contents of amino acids in Wild Codonopis Lanceolata by RP—HPLC．Methods：Pro． teins were hydrolyzed by 6 mol／L HC1．The separation was performed in a Hypersil ODS—BP C18(4．6 mm×250 mm．5 Ixm)column with a mobile phase of NaAc—HAc—CH3 OH(gradient elution)．The flow rate was 1．0 mL／min．RP—HPLC was applied to determine the contents of amino acids at 450 nm with fluorescence detection(FLD)with OPA pre—column residue $河南省教育厅自然科学基金资助项目 200510459066 根据形态与功能相一致的观点，2005年乡男、乡女、 较往年有所提高，营养状况进一步改善；但机能指标 城女的胸围都比2000年有所下降(表2)，故肺活量 下降。乡村小学生的发育水平远低于城市小学生。 的下降是必然的。结合目前河南省学生课业普遍较 参考文献 重的实际情况，从因果关系去考虑，可能是运动量不 足影响了呼吸系统形态与机能的发育。