叶酸及一碳代谢相关b族维生素在食管癌发生的表观遗传机制研究.doc

叶酸及一碳代谢相关B族维生素在食管癌发生的表观遗传机制研究 黄桂玲，孙桂菊* （）近年来，叶酸抗肿瘤的研究成为热点。叶酸是一种水溶性维生素，主要存在于新鲜蔬菜、水果和动物肝脏之中，人体不能直接合成，必须通过膳食摄入。大量证据表明，食物在消化道肿瘤的发生、发展中起着非常重要的作用。食物中大量的生物活性物质在癌细胞各个形成阶段从各个途径发挥着作用。这些相关途径包括细胞凋亡、细胞周期控制、细胞分化、血管发生、DNA 修复以及致癌物代谢等。这些过程受到DNA 甲基化和其他表观遗传学事件的调节。表观遗传学事件组成了一种重要的机制, 食物组分能选择性地使基因表达激活或者失活[1]。目前推测膳食叶酸摄入量与食管癌的发生存在相关性，多项研究结果表明，叶酸摄入量与食管癌的发生呈负相关[2]，但其与食管癌发生的内在机制尚不清楚。 有两种机理可以解释低叶酸状态增加患癌的危险性：第一，叶酸缺乏可抑制甲硫氨酸合成反应，改变DNA的甲基化水平。由于DNA甲基化是基因表达调控的重要机制，启动子区DNA的低甲基化或高甲基化将可能导致原癌基因不当激活和抑癌基因失活，引起细胞选择性生长和转化，启动致癌过程。第二，叶酸是正常DNA合成和修复所必须的，叶酸缺乏可造成DNA合成和修复能力降低，从而推测可增加肿瘤发生的危险。其中，DNA甲基化是目前研究最为深入的表观遗传机制之一[3]。 作者简介：黄桂玲（1980-），女，在读博士研究生， 主要从事营养与肿瘤研究。E-mail: huanggl1980@163.com *通讯作者：孙桂菊（1963-），女，教授， E-mail: gjsun@ 1.叶酸及一碳单位代谢相关B族维生素与DNA甲基化的关系 叶酸及一碳单位代谢相关B族维生素与DNA甲基化密切相关。叶酸在体内的活性形式是一碳单位代谢的辅酶[4]。叶酸及一碳单位代谢相关B族维生素通过参与甲硫氨酸循环提供甲基，在DNA 甲基化中起着关键作用。在叶酸缺乏的条件下，其主要循环形式5-甲基-THF水平低下，这会导致半胱氨酸向甲硫氨酸的转化降低, 而致可用的S-腺苷甲硫氨酸很快处于耗竭状态，导致甲基基团供应不足，进而引起DNA低甲基化。 除叶酸外，其他B族维生素如维生素B12、维生素B6、维生素B2间接影响DNA甲基化。5,10-CH2THF经过亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetra- hydrofolate，MTHFR)的催化，转变为5-甲基四氢叶酸(5-CH3THF)。后者参与同型半胱氨酸复甲基化形成甲硫氨酸，该反应需要甲硫氨酸合酶(methionine synthase，MS)的催化，5-CH3THF脱下的甲基首先转移到钴胺素(VitB12)，形成甲基钴胺素，通过甲基钴胺素转化为钴胺素，再将甲基转移至同型半胱氨酸。钴胺素是一种强还原剂，很容易被氧化为非活性形式，需要在甲硫氨酸合酶还原酶(methionine synthase reductase，MTRR)的作用下重新生成其活性形式才能继续发挥作用。甲硫氨酸合成酶(MS)将高半胱氨酸催化为甲硫氨酸（Met），是甲基化过程的重要环节。MS由5-甲基四氢叶酸提供初级甲基供体，包含B12辅酶。当维生素B12缺乏时， 细胞叶酸以甲基叶酸的形式积聚，被阻滞在MS 反应阶段，不能被代谢利用，产生功能性的叶酸缺乏， 被称作“甲基叶酸阻滞”。维生素B12缺乏可引起甲基化水平降低而导致DNA损伤。Piyathilake等[5]发现，有研究认为，长期慢性的叶酸与维生素B12缺乏，与食管鳞状细胞癌和胃贲门腺癌的高发有关[6]。 甲硫氨酸是S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl methionine，SAM)的前体物质，后者是体内100多个生理反应通用甲基供体，包括DNA、RNA和膜磷脂的甲基化反应。在所有细胞中，通过多种甲基转移酶的作用，SAM被转变为S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)，SAH经S-腺苷同型半胱氨酸水解酶水解为同型半胱氨酸和腺苷。同型半胱氨酸可以与丝氨酸在VitB6依赖的胱硫醚β-合酶催化下形成胱硫醚，经转硫反应生成半胱氨酸。VitB2主要功能是作为辅酶黄素单核苷酸(flavin-mononucleotide，FMN)和黄素腺嘌呤二核苷酸(flavinadenine dinucleotide，FAD)以及共价结合黄素的前体物质，这些辅酶参与叶酸和VitB6的代谢，FAD是MTHFR的共作用因子；VitB2缺乏时，VitB6转化为其辅酶衍生物的过程可能受到损伤。目前大多研究集中在叶酸和肿瘤，将几种B族维生素与肿瘤的研究也集中在其他癌症[5]，与食管癌的研究很少。 从以上内容可以看出，叶酸及一碳单位代谢相关B族维生素通过影响甲基团的供给来影响甲基化过程, 其相关过程包括一碳代谢和甲硫氨酸循环。叶酸是甲基的供体, VitB