HPLC法测定乳康颗粒中丹酚酸B含量.docVIP

HPLC法测定乳康颗粒中丹酚酸B含量摘要：目的：建立乳康颗粒中丹酚酸B的含量测定方法。方法：采用HPLC法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇―乙腈―水―甲酸（22∶10∶68∶2）为流动相；检测波长：286nm。结果：丹酚酸B在0.146～0.730μg之间呈良好的线性关系（r=0.9996），平均加样回收率为99.4％，（RSD＝1.0％，n=5）。结论：本法灵敏、准确、重现性好，精密度高、专属性强。可用于乳康颗粒的质量控制。 关键词：乳康颗粒；丹酚酸B；高效液相色谱法? 中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1673-7717（2007）04-0824-02 乳康颗粒由牡蛎、乳香、瓜蒌、玄参、莪术、丹参等15味中药经加工提取制成，具有舒肝解郁、理气止痛、活血破瘀、消积化痰、软坚散结、补气健脾等效用。用于乳腺增生病。为有效控制其质量，本文采用HPLC法测定其中丹酚酸B含量，经方法学考查，其精密度、重复性、稳定性、加样回收率均符合要求。? 1仪器与试药? 1.1仪器日本岛津LC-10Avp高效液相色谱仪；LC-10Avp泵；SPD-10Avp可见紫外检测器；浙大N2000色谱工作站；AS3120A超声提取器；METTLER AB135-S十万分之一电子天平（瑞士）。? 1.2试药丹酚酸B对照品（由中国药品生物制品检定所提供、批号为111562-200403，纯度为100％）；甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。? 2方法与结果? 2.1色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇―乙腈―水―甲酸（22∶10∶68∶2）为流动相；流速：1.0mL/min，柱温：30℃；检测波长：286nm。理论塔板数按丹酚酸B峰计算应不低于3000。? 2.2对照品溶液的制备取丹酚酸B对照品质量，精密称定加甲醇制成每1mL含0.036mg的溶液，即得。? 2.3供试品溶液制备取装量差异项下的本品，研细，混匀，取4.5g（无蔗糖1.5g），精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇25mL，称重，超声提取40min，放冷，再次称重，用甲醇补足减失重量，滤过，取续滤液，即得。? 2.4阴性液干扰试验按处方取除丹参以外的其它药材，按样品制备工艺制备，再按供试品溶液制备方法同法操作，制成阴性液。精密吸取供试品溶液，阴性液与对照品溶液各10μL，注入液相色谱仪中。在与对照品色谱峰相应的位置处，供试品溶液具有相同保留时间的色谱峰，阴性液在此峰位无吸收，对本品中丹酚酸B含量测定无干扰，方法专属性良好。? 2.5标准曲线的绘制与线性范围考察取丹酚酸B对照品7.30mg，置100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，制成每1mL含0.073mg的溶液。分别精密吸取丹酚酸B对照品溶液2、4、6、10μL，按上述色谱条件进行色谱分析，测定色谱峰面积，以进样量为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，其回归方程为Y＝423781X-180.46，相 关系数r=0.9996。结果表明，丹酚酸B进样量为0.146～0.730μg范围内线性关系良好。? 测定结果显示：本方法回收率在95.5％～100.8％之间，RSD为1.0％。? 2.6样品含量测定按前述供试品溶液制备方法和色谱条件，测定3批样品中丹酚酸B含量，结果均在0.489～0.588mg/袋之间。? 3小结与讨论? 丹参中主要水溶性成分为丹酚酸B，其性质稳定，以丹酚酸B为对照品，参照中国药典2005年版一部中丹参药材［含量测定］项下方法［1］，采用高效液相色谱法测定其含量，在色谱图中丹酚酸B与其它色谱峰完全分离。本制剂在流动相上加以改进，进行含量测定，重复性好、精密度高、稳定性强，丹参阴性液无干扰。? 本制剂为经水提取制成的制剂，采用水作为提取溶剂，干扰成分较多，使丹酚酸B与其他成分色谱峰不能达到基线分离，因此采用甲醇超声提取，丹酚酸B与其他成分色谱峰分离较好。? 根据上述测定结果，暂定本品每袋含丹参以丹酚酸B（C36H30O16）计算，不得少于0.450mg/袋。 本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。 1