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反相高效液相色谱法测定人参源胶囊中人参皂苷Rh2含量
反相高效液相色谱法测定人参源胶囊中人参皂苷Rh2含量摘要: 目的测定人参源胶囊中人参皂苷Rh2的含量。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱:ODS-C18 (5μm,250 mm×4.6 mm), 流动相:乙腈-水(60:40),流速: 1.0 mL/min,检测波长:203 nm,柱温:30℃。结果人参皂苷Rh2在0.08~0.24 mg/mL的浓度范围内,其进样量与峰面积呈良好的线性关系,r =0.999 2,平均回收率为99.75%(n=6)。结论本法简便、快捷、准确,重复性好,可用于人参源胶囊含量的测定和质量控制。
关键词:高效液相色谱法;人参皂苷Rh2;含量测定
中图分类号: R927.2文献标识码:A文章编号:1672-979X(2008)07-0035-03
Quantitative Determination of Ginsenoside Rh2 in Ginseng Capsules by RP-HPLC
FENG Lin1, ZENG Xian-bin1*, HU Xian-hui2
(1.Jiangxi University of TCM, Nanchang 330004, China; 2.Tianjin Tasly Modern TCM Resources Co.,Ltd, Tianjin 300402, China)
Abstract:Objective To determine the content of ginsenoside Rh2 in Ginseng Capsules. Methods A RP-HPLC method was adopted with ODS-C18 column (5 μm,250 mm×4.6 mm), mobile phase of acetonitrile-water(60:40), flow rate of 1.0 mL/min and column temperature of230℃. The detection wavelength was 203nm. Results There was a good linear relationship for ginsenoside Rh2 in the range of 0.08 mg/mL~0.24 mg/ mL(r = 0.999 2) and the average recovery was 99.75%(n=6). Conclusion This method is simple, rapid and accurate for the assaying and quality control of Ginseng Capsules with a good reproducibility.
Key words:HPLC; ginsenoside Rh2; assay
人参(Pamax ginseng C.A.Mey.)为五加科多年生草本植物,其诸多的生物活性成分近年来被研究者所关注。红参中含有人参皂苷Rh2,是生晒参和白参所没有的特殊成分。现代药理学医学表明,人参皂苷Rh2具有明显的抗肿瘤作用,对癌细胞有分化诱导和抑制作用[1, 2]。人参源胶囊是以吉林红参提取物为主要原料,含多种人参皂苷成分,尤其以人参皂苷Rh2含量较高。本实验采用反相高效液相色谱法,通过对不同提取方法和不同流动相的研究,最终确立用甲醇提取,以乙腈-水为流动相,测定人参源胶囊中的主要成分人参皂苷Rh2,方法简便,可靠,操作性强。
1仪器与试药
1.1仪器
HPLC系统(Waters2695专用泵); 2487双通道紫外-可见光检测器; Empower色谱工作站
1.2试药
人参皂苷Rh2对照品(中国药品生物制品检定所);人参源胶囊(批号:070201,070202,070203,天士力现代中药资源有限公司);乙腈(Merck色谱纯);超纯水;其他试剂均为分析纯。
2实验方法
2.1色谱条件[3]
流动相:乙腈-水(60:40),流速:1.0 mL /min;色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶(YMC-Pack ODS-A,5μm , 250 mm×4.6 mm);柱温:30℃;检测波长:203 nm。
2.1.1检测波长的选择[3]取人参皂苷Rh2 对照品的甲醇溶液,经紫外-可见分光光度计扫描,在203 nm处有最大吸收,故选203 nm为测定波长。
2.1.2系统适应性试验取0.202 mg/ mL人参皂苷Rh2对照品溶液,连续进样5次,其峰面积RSD1.8% ;其主峰的理论板数(N)和对称因子(f)依次为20000和1.01;主峰与邻
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