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实验性自身免疫性重症肌无力动物模型建立摘 要：实验性自身免疫性重症肌无力动物模型在临床表现、药理学、电生理、免疫学及组织学表现等方面已经证明与重症肌无力患者极为相似，是进一步研究人类重症肌无力的极佳工具。介绍实验性自身免疫性重症肌无力动物模型的各种制备方法、其检测指标及影响动物模型成功的因素。 关键词：重症肌无力；主动免疫；乙酰胆碱受体；Lewis大鼠 中图分类号：R-332 文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2008)03-0518-03 The Found of Animal Models of Experimental Autommune Myasthenis Gravis JIN Di，ZHANG Li-de，LIU Yu (Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Shenyang 110032，Liaoning，China) Abstract：The experimental autommune myasthenis gravis animal models and myasthenis gravis patients appearance have been proved to be very resemble in clinical manifestation，pharmacology，electrophysiology，immunology and histology.They are the best tools of researching mankind myasthenis gravis.This text mainly introduces the preparative method of making the experimental autommune myasthenis gravis animal models and the indicatrix and the factors which affect succeed. Keywords：myasthenis gravis；active immunity；acetylcholine receptor；Lewis rats 重症肌无力(myasthenia gravis，MG)是一种神经肌肉接头传递障碍的获得性自身免疫性疾病。病变主要是累及神经-接头突出后膜上乙酰胆碱受体(acetylcholine receptor，AchR)。临床主要表现为受累骨骼肌肉极易疲劳，经休息和服用抗胆碱酯酶药后可部分恢复为特征。乙酰胆碱受体抗体(AChR antibody， AChRab)的增加是MG发病机制中的主要因素，但是其致病机理和治疗方法尚有待于进一步完善，因此研究实验性动物模型的制备具有重要意义。 当人们意识到AChRAb是MG发病关键所在之后，1973年Pat rick等首先从电鳗电器官提取纯化AChR ，免疫接种新西兰大白兔后获得实验性自身免疫性重症肌无力(experimental autoimmune myasthenia gravis ， EAMG)模型，后来在大鼠、小鼠、豚鼠、猴用同样方法也制备了EAMG模型[1-5]。随着蛋白质组织化学的发展，现已掌握了人及一些实验动物AChR主要致病区的肽链结构，因此出现了用合成多肽作为免疫原制备EAMG模型的方法。 1 模型制备方法 1.1以AchR蛋白为免疫原建立动物模型从丁(氏)双鳍电鳐的电器官分离乙酰胆碱受体(AchR)免疫大鼠，建立实验性重症肌无力(EAMG)动物模型。方法：参照徐浩鹏等[6]方法从丁(氏)双鳍电鳐的电器官提取AchR蛋白，并采用Folin酚试剂法及酶联免疫吸附法(ELISA)检测提取蛋白的含量及活性；以提取的蛋白主动免疫Lewis大鼠，健康、雌性8周龄Lewis大鼠24只随机分为3组，即正常对照组、福(氏)完全佐剂(CFA)对照组、AchR+CFA实验组，每组8只。实验组大鼠分别于足垫、腹部及背部皮下多点注射乳剂1.5mL，第4周再次注射上述乳剂免疫大鼠。CFA对照组只接受等量CFA皮下注射[7]。 1.2用MG患者血清中的AchR抗体建立动物模型重症肌无力被动转移小鼠模型(P-EAMG)的制作，血清阴性(SNMG)和血清阳性(SPMG)组小鼠每日分别腹腔注射SNMG或SPMG患者血清0.6mL，连续7天。对照组小鼠注射方法同P-EAMG组。所有小鼠定义词注射血清后24h腹腔注射环磷酰胺(300mg/kg)，以抑制小鼠对人血清蛋白的免疫反应[8]。还有用胸腺移植建立重症肌无力动物模型，Schonbeck等[9]将MG患