归脾汤对抑郁模型大鼠血清皮质酮雌激素含量影响实验探究.docVIP

归脾汤对抑郁模型大鼠血清皮质酮雌激素含量影响实验探究摘要：目的：观察归脾汤对慢性不可预见性模型大鼠血清皮质酮、雌激素(E2)水平的影响，初步探讨其防治抑郁症的可能机制。方法：选择体重、行为学评分相近的普通级Wistar雌性大鼠40只，按随机原则分为对照-组、模型组、盐水组、中药组。应用慢性不可预见性中等强度应激复制抑郁症动物模型。观察归脾汤对该模型大鼠的作用。定期测定各组大鼠体重及其行为的改变；利用放免法测定大鼠血清中皮质酮及E2含量。结果：模型组大鼠体重、水平和垂直运动得分、逃避潜伏时和游过的距离、血清中皮质酮、E2含量均与对照组有显著差异；而中药组大鼠以上各指标均与对照组无明显差异。结论：①归脾汤能够对抗模型大鼠血清皮质酮的异常分泌。②归脾汤能够维持模型大鼠血清E2正常分泌。③归脾汤抗抑郁症的作用可能与维持皮质酮、E2的正常分泌有关。 关键词：归脾汤；抑郁症；不可预见性应激；皮质酮；雌激素 中图分类号：R-33　文献标识码：A　文章编号：1673-7717(2007)11-2349-03 抑郁症是常见的情感障碍，其发病机制目前尚不十分确切，但海马神经细胞损伤及再生障碍可能是主要原因。据报道，血清中高浓度皮质酮可引起海马神经细胞胞内Ca2超载，而胞内Ca2超载可导致细胞损伤已成为公认事实。同时大量研究表明，生理性雌激素可以促进神经元生长，阻止神经元细胞萎缩，调节突触的可塑性，促进神经元细胞再生。 归脾汤具有益气补血、健脾养心之功，主治心脾两虚、气血不足之证。临床应用归脾汤治疗抑郁症取得满意疗效。但有关归脾汤抗抑郁机理的研究较少。因此本实验主要从整体水平观察归脾汤对抑郁模型大鼠的影响，并初步探讨其可能机制。 1　材料与方法 1.1　材料 健康雌性普通级Wistar大鼠，体重(220±20)g，由辽宁中医药大学动物实验中心提供。自由进食饮水，室温适应性饲养。 1.2　实验仪器 自制Open―field行为学检测箱，B12000―Morris水迷宫视频跟踪分析系统，DFlVl―96型10管放射免疫Y计数器，Olympus荧光显微镜。 1.3　实验方法 1.3.1　动物分组将大鼠适应性喂养1周后，选择体重、行为学得分和学习记忆能力相近的40只大鼠，随机分为对照组、抑郁症模型组(模型组)、抑郁症模型+生理盐水组(盐水组)和抑郁症模型+归脾汤组(中药组)，每组10只。 1.3.2　抑郁模型的建立除对照组外，其余3组均建立改进的慢性不可预见性应激模型。方法是在21天内对大鼠施加电击足底(36V交流电，5min)、冰水游泳(4℃，5min)、摇晃(5min)、夹尾(1min)，禁水(24h)，禁食(24h)等刺激，每天一种刺激方法，随机施加，使动物不能预见刺激的种类，每种刺激重复3～4次。 1.3.3 药物及给药方法归脾汤组成：白术30g，茯神30g，黄芪30g，龙眼肉30g，酸枣仁30g，人参15g，木香15g，甘草8g，当归3g，远志3g，购于辽宁中医药大学附属医院药局。按常规方法煎煮，浓缩至2g／mL，4℃冰箱保存备用。对照组不给药；模型组只施加灌胃动作但不给药；盐水组于每次刺激前半小时灌服2mL生理盐水；中药组，根据临床成人用量折算成大鼠灌胃剂量，每天给药1mL／100g，于每次刺激前半小时灌服，共给药21天。 1.3.4　大鼠体重和行为学评分的测量大鼠体重的测量在实验开始的第0天和第22天的同一时间，按照大鼠序号进行测量。大鼠行为学评分的测量在实验开始的第0天和第22天，于大鼠测量完体重后用Open--field法进行检测。 1.3.5　大鼠学习记忆能力的测验在实验开始的第O天和第22天，用Morris水迷宫视频跟踪分析系统进行测量。正式检测前对大鼠进行训练，每天训练2次，连续7天。正式检测时，以3rain内大鼠找到休息平台所游过的距离和逃避潜伏时作为评价标准，同时记录其游过的路线图。 1.3.6　大鼠血清皮质酮E2 FSH LH水平检测在实验进行的第22天，大鼠经20％乌拉坦(0.4mL／100g)麻醉后，腹主动脉取血2mL，离心后取血清，低温冷藏备用。采用放免法检测血清皮质酮、雌激素浓度，此项工作由沈阳军区总医院内分泌实验室协助完成。 1.3.7　数据处理数据以x±s形式表示，采用SPSS 10.0统计软件处理，统计方法采用ANOVA法、单因素方差分析和两两比较，如不满足方差分析条件时用秩和检验。 2　结果 实验过程中没有实验动物的死亡及脱失情况发生，各组有效例数均为10例。 2.1　各组大鼠体重的改变 由表1结果显示：①第0天各组大鼠体重无差异。②第22天，模型组和盐水组大鼠体重较对照组显著下降(P0