酵母高质粒小量提取试剂盒.pdfVIP

◆ 酵母高纯度质粒小量快速提取试剂盒 ◆ 目录号 1206 ◆ 使用手册 ◆ 实验室使用，仅用于体外 酵母高纯度质粒小量快速提取试剂盒 目录号：1206 目录编号 包装单位 120601 50次  适用范围： 适用于酵母小规模质粒制备（mini preparations ）  试剂盒组成、储存、稳定性： 试剂盒组成 保存 50 次 RNaseA （10mg/ml） -20℃ 150µl Lyticase -20℃ 2500U 溶液YP1 4℃ 15 ml 溶液YP2 室温 15 ml 溶液YP3 室温 20 ml 去蛋白液PD 室温 25 ml 15 ml 漂洗液WB 室温 第一次使用前按说明加指定量乙醇 洗脱缓冲液 EB 室温 15 ml 吸附柱AC 室温 50 个 收集管（2ml ） 室温 50 个 本试剂盒在室温储存12 个月不影响使用效果。 - 1 - 储存事项： 1. 第一次使用时，将试剂盒所带的全部RNase A 加入溶液YP1 （终浓度100µg/ml） 置于4℃保存。如果溶液YP1 中RNase A 失活，提取的质粒可能会有微量RNA 残 留，在溶液YP1 中补加RNase A 即可。 2. 环境温度低时溶液YP2 中SDS 可能会析出浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热几 分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。 3. 为避免降低活性，方便运输，提供 Lyticase (2500U)为冻干粉状，收到后，可短暂 离心后，加入0.25 毫升灭菌水溶解配制成 10U/μl，因为反复冻融可能会降低酶活 性，因此溶解后立即按照每次使用量分装冻存，－20 ℃保存。 4. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化，各溶液使用后应及时 盖紧盖子。  产品介绍： 本试剂盒采用改进 SDS-碱裂解法裂解细胞并结合lyticase 特异消化酵母细胞壁， 能在1 小时内从酵母培养液中分离出高纯度质粒DNA 。酵母收集后,加入破壁酶去除细 胞壁后,然后碱裂法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低 PH 值状态下选择 性地结合溶液中的质粒DNA ，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除， 最后低盐、高PH 值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA 从硅基质膜上洗脱。  产品特点： 1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附 量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。 2. 快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。获得的 质粒产量高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR 、体外转录、测序等各种 分子生物学实验。 - 2 -  注意事项： 1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机， 如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 2. 溶液YP3和去蛋白液PD 中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮 肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，